[发明专利]一种聚乙二醇修饰的蛋白质药物的修饰位点的测定方法

摘要

本发明属于药物分析技术领域，具体而言涉及一种聚乙二醇修饰的蛋白质药物的修饰位点的测定方法，其中所述修饰位点为氨基修饰位点，所述氨基选自多肽链N末端的α氨基或多肽链中赖氨酸残基的ε氨基。本测定方法操作简单，适应性好，结果准确，可广泛用于聚乙二醇修饰的蛋白质药物中氨基修饰位点的确证，从而充分满足质量控制的要求。

主权项

一种聚乙二醇修饰的蛋白质药物的修饰位点的测定方法，其中修饰位点为氨基，所述方法包括以下步骤：(1)以聚乙二醇修饰的蛋白质药物的位置异构体为原料，制备均一化修饰的多肽片段，其中所述多肽片段与聚乙二醇共价连接，且具有4‑15个氨基酸残基；(2)采用Edman降解法测定步骤(1)中的均一化修饰的多肽片段的氨基酸序列，其中经过Edman降解获得的PTH氨基酸由柱前衍生的高效液相色谱进行分析；(3)将步骤(2)中的氨基酸序列对应至相应的蛋白质药物序列，若步骤(2)中出现两个无法正常测出的氨基酸，那么除半胱氨酸外的那个氨基酸所对应的位点即为修饰位点；若步骤(2)中仅出现一个无法正常测出的氨基酸，那么该氨基酸所对应的位点即为修饰位点，其中聚乙二醇修饰的蛋白质药物选自聚乙二醇干扰素或聚乙二醇降纤酶。