[发明专利]中药组合物制剂中多种成分含量的测定方法

摘要

本发明公开了一种中药组合物制剂中多种成分含量的测定方法，属于中药领域，具体制备步骤为供试品溶液的制备、对照品溶液的制备、UPLC检测、标准曲线的制定及结果计算。本发明的测定周期短、灵敏度高。

主权项

一种中药组合物中多种成分含量的测定方法，该中药组合物包括下列重量份的原料药:金银花200‑300 板蓝根200‑300 广藿香60‑100 绵马贯众200‑300 红景天60‑100 苦杏仁60‑100 甘草60‑100 石膏200‑300，该中药组合物的制备过程为：广藿香碎断，加8‑10倍量水提取挥发油，提油时间4小时，收集挥发油，备用，提取液过滤后，残渣弃去，滤液备用；金银花、石膏、板蓝根、绵马贯众、甘草、红景天，加7‑11倍量水煎煮至沸，加入苦杏仁，煎煮2次，每次0.5‑2.5小时，提取液合并过滤，所得滤液与广藿香提油后的滤液合并，浓缩成在60℃时测定相对密度为1.10‑1.15的水提液，其特征在于该中药组合物中多种成分含量测定方法由以下步骤组成：A、供试品溶液的制备：量取该中药组合物5‑8ml，加水4ml摇匀，超声提取10‑20min，过滤，即得；B、对照样品溶液的制备：分别称取绿原酸、甘草苷、甘草酸铵、新绿原酸、3,4‑二咖啡酰奎宁酸、4,5‑二咖啡酰奎宁酸对照品，加70%甲醇，摇匀，即得各对照品溶液；C、UPLC检测：色谱柱为C18，柱温20‑50℃，流动相为甲醇‑乙腈‑0.1%磷酸溶液，梯度洗脱：0‑3min，5%甲醇，5%乙腈，90%的0.1%磷酸；3‑8min，5%甲醇，5‑40%乙腈，90‑55%的0.1%磷酸；8‑11min，5%甲醇，40‑85%乙腈，55‑10%的0.1%磷酸；11‑11.5min，5%甲醇，85‑5%乙腈，10‑90%的0.1%磷酸；11.5‑13min，5%甲醇，5%乙腈，90%的0.1%磷酸；检测波长237nm，流速为0.2‑0.4ml/min；D、标准曲线的制定及计算结果:分别将绿原酸、甘草苷、甘草酸铵、新绿原酸、3,4‑二咖啡酰奎宁酸、4,5‑二咖啡酰奎宁酸对照品溶液0.4‑2.0μL注入步骤c中超高效色谱仪中分析，以色谱峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，得到各对照样品溶液的标准曲线；然后将供试样品溶液注入超高效色谱仪中分析，将各成分峰面积带入标准曲线中，得到绿原酸、甘草苷、甘草酸铵、新绿原酸、3,4‑二咖啡酰奎宁酸、4,5‑二咖啡酰奎宁酸的含量。