[发明专利]一种微生物发酵生产吡咯喹啉醌的方法及所用的发酵培养基

摘要

本发明公开了一种微生物发酵生产吡咯喹啉醌的方法和所用发酵培养基。采用控氧发酵培养法培养甲基营养菌，发酵培养基中含有的碳源为甲醇、氮源为硫酸铵，在发酵过程中分阶段控制溶解氧水平为饱和溶氧的30-50%，通过补料控制pH在5.5-6.0，通过pH-氮源联控技术实现补料，在7.5L发酵罐中培养6天最终细胞密度（OD600）超过10，PQQ产量达到了2g/L，PQQ生产强度为333.33mg/L/天，本发明操作简单，便于实现自动控制和连续发酵，为使用甲基营养菌工业化生产吡咯喹啉醌奠定了坚实的基础。

主权项

一种微生物发酵生产吡咯喹啉醌的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）活化菌种：将原始菌种甲基营养菌Methylovorus sp.MP688接种到固体培养基中，在适合原始菌种生长的条件下进行培养，得活化的菌种；（2）种子液的培养：将步骤（1）所得活化好的菌种接种到液体培养基中，在适合菌体生长的条件下进行培养，得种子培养液；（3）发酵罐发酵：将步骤（2）所得种子培养液按比例接种到含有发酵培养基的发酵罐中；发酵培养过程中温度恒定，同时，发酵罐的pH、溶解氧和搅拌转速采用两阶段控制策略；氮源补料采用pH‑氮源联控方式进行，碳源补料采用间歇补料方式进行；（4）收获发酵液，得吡咯喹啉醌。