[发明专利]一种萝卜原花青素二聚体的制备方法

摘要

一种萝卜原花青素二聚体的制备方法，属于原花青素分离制备技术领域。本发明以市售萝卜红色素和聚酰胺树脂为原料，经溶解及过滤、纳滤、上柱及洗脱、以及冷冻干燥而制得萝卜原花青素二聚体冻干粉。本发明具有加工工艺简单、设备实用、操作便利、分离效果好、提取率高、节约能源、资源综合利用率高、无有害物质排放，制备出的萝卜原花青素二聚体具有纯度高、溶解性好、抗氧化能力强、产品性能稳定等特点。采用发明方法制备出的产品可广泛应用于医药、保健品、食品和日化等行业。

主权项

一种萝卜原花青素二聚体的制备方法，其具体步骤如下：(1)制备萝卜原花青素低聚体溶液以市售萝卜红色素为原料，先按照纯净水∶无水乙醇∶异丙醇的体积比为1mL∶6～8mL∶13～11mL的比例，将纯净水、无水乙醇和异丙醇混合均匀，制备出乙醇‑异丙醇‑水溶液，随后按照萝卜红色素质量∶乙醇‑异丙醇‑水溶液之比为1g∶50～200mL的比例，向乙醇‑异丙醇‑水溶液中加入萝卜红色素，搅拌溶解5～20分钟，将该悬浊液进行真空过滤，分别收集滤过液和滤渣，滤过液即为萝卜原花青素低聚体溶液；(2)制备萝卜原花青素低聚体纳滤液第(1)步完成后，将第(1)步制备出的萝卜原花青素低聚体溶液，泵入截留分子量为800～1200Da的纳滤器中，在0.2～0.4MPa下，进行纳滤分离，直至纳滤截留液的体积为原体积的20～30％时止，收集纳滤截留液与滤过液；将收集的纳滤截留液，补充第(1)步制备的乙醇‑异丙醇‑水溶液至原体积，在0.2～0.4MPa下，进行第二次纳滤分离，至第二次纳滤截留液的体积减少至原体积的5～15％时止；并将两次收集的纳滤滤过液合并，即为萝卜原花青素低聚体纳滤液；(3)制备聚酰胺树脂粉末压力层析柱第(2)步完成后，以市售30～60目聚酰胺树脂为原料，将其装入超微粉碎机中，进行超微粉碎处理；再用分样筛进行筛分处理；选取粒径在13～25微米之间的聚酰胺树脂粉末，分散于纯净水中，并装配成聚酰胺树脂粉末压力层析柱，再用与聚酰胺树脂粉末等体积的纯净水进行反冲；(4)制备萝卜原花青素二聚体溶液第(3)步完成后，按照聚酰胺树脂粉末体积∶萝卜原花青素低聚体纳滤液体积比为1mL∶8～12mL的比例，在0.5～0.8MPa条件下，将第(2)步收集的萝卜原花青素低聚体纳滤液泵入第(3)步装配的聚酰胺树脂粉末压力层析柱中，直至流出液为浅红色为止，用2倍于聚酰胺树脂粉末压力层析柱体积的纯净水进行洗涤，纯净水的流速为聚酰胺树脂粉末压力层析柱体积的3～6倍/小时，先用质量浓度为40～60％的乙醇溶液进行第一次洗脱，以洗脱萝卜原花青素二聚体，第一次洗脱液的流速为聚酰胺树脂粉末压力层析柱体积的3～6倍/小时，直至洗脱液无红色时为止，收集第一次的洗脱液，即为萝卜原花青素二聚体溶液；随后用甲酸∶质量浓度70～80％的乙醇溶液之比为1mL∶110～140mL的溶液进行第二次洗脱，直至洗脱液无色时止，第二次洗脱液的流速为聚酰胺树脂粉末压力层析柱体积的3～6倍/小时；第二次的洗脱液经浓缩、冻干制成冻干粉，即为萝卜红色素单聚体，向第二次洗脱后的聚酰 胺树脂粉末压力层析柱中，泵入2倍聚酰胺树脂粉末压力层析柱体积的纯净水进行清洗，纯净水的泵入速度为聚酰胺树脂粉末压力层析柱体积的3～6倍/小时；(5)制备萝卜原花青素二聚体粉末第(4)步完成后，将第(4)步得到的萝卜原花青素二聚体溶液泵入到真空薄膜蒸发器中，在真空度为0.09～0.095MPa、温度为20～30℃条件下，进行真空薄膜蒸发，直到溶液中萝卜原花青素二聚体含量达25～35％时止；原花青素二聚体浓缩液置于‑16～‑20℃温度下，预冻3～5小时，再放置于冷冻干燥机中，在真空度为20～40Pa、温度为‑50～‑60℃条件下，进行冷冻干燥24～36小时，就制备出纯度达95.2～98.4％，分子量为960.4Da的萝卜原花青素二聚体粉末，总收得率为88.7～92.6％。