[发明专利]携带外源基因的复制型HBV载体、其转染后产生的重组HBV,和相应的制备方法与应用有效
申请号: | 201310078604.3 | 申请日: | 2013-03-12 |
公开(公告)号: | CN103173492A | 公开(公告)日: | 2013-06-26 |
发明(设计)人: | 孙殿兴;程欣;王梓华;武丽;李东;康富标 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军白求恩国际和平医院 |
主分类号: | C12N15/86 | 分类号: | C12N15/86;C12N15/66;A01K67/027;C12N5/10;C12N7/01;C12R1/93 |
代理公司: | 石家庄科诚专利事务所 13113 | 代理人: | 张红卫;左燕生 |
地址: | 050000 河北省石家庄市中山西路3*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | 本发明公开了一种携带外源基因的复制型HBV载体及该型载体转染细胞后产生的重组HBV,以及相应的制备方法与应用,所述载体是在原有表达HBV的质粒基础上,利用分子克隆技术将HBV基因组上重叠的C基因和P基因分开,各自形成完整开放读框,其间插入蛋白翻译起始序列或蛋白酶切位点,分别引导外源基因和P基因表达;携带外源基因的复制型HBV载体瞬时转染肝癌细胞后分泌重组HBV;本发明所提供的制备HBV载体转染细胞后,所产生的重组HBV能够在表达外源基因的同时,仍保留了复制和感染能力;本发明适用于构建HBV慢性感染动物模型、构建HBV的cccDNA稳定自主复制的细胞模型,构建可示踪的HBV病毒株,用于研究HBV感染,复制,包装等环节的分子机制,筛选抗HBV新药。 | ||
搜索关键词: | 携带 基因 复制 hbv 载体 转染 产生 重组 相应 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种携带外源基因的复制型HBV载体,其特征在于:它是在HBV病毒的基础上,利用分子克隆技术将HBV基因组上重叠的C基因和P基因分开,各自形成完整开放读框,其间插入蛋白翻译起始序列或蛋白酶切位点,分别引导外源基因和HBV P基因表达;所述的外源基因的碱基对个数小于700bp;所述的蛋白翻译起始序列为内部核糖体进入位点的短小的碱基序列;蛋白酶切位点均为短小的碱基序列。
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