[发明专利]一种利用HPLC-ELSD检测剑麻皂苷元含量的方法

摘要

本发明公开了一种利用HPLC-ELSD检测剑麻皂苷元含量的方法。设置HPLC装置：Shim-packVP-ODS，C18柱250毫米×4.6毫米×5微米；ELSD检测器：漂移管温度40℃，载气压力350KPa，流动相为无水甲醇:水=9:1(体积比)，流速1毫升/分钟，进样量10微升，时间35分钟，柱温为40℃；根据标准品的检测绘制标准曲线，得曲线方程；计算待测样品的峰面积，代入所得的标准曲线方程，计算出待测样品中剑麻皂苷元的含量。本发明采用HPLC- ELSD，即高效液相色谱和蒸发光散射检测器结合，检测快速，且不受流动相组成的干扰，不要求被测主要成分有特定的化学结构，因此，对剑麻皂苷元检测的效果好。

主权项

一种利用HPLC‑ELSD检测剑麻皂苷元含量的方法，其特征在于具体步骤为：(1)设置装置：设置HPLC装置岛津LC‑20AB高效液相色谱仪工作站的色谱条件：Shim‑pack VP‑ODS， C18柱的规格为长度250 毫米×内径4.6毫米×粒度5微米；开启ELSD检测器，设置漂移管温度为40℃，载气压力为350KPa，待所设置参数平稳后将无水甲醇和去离子水作为A泵和B泵的流动相输入岛津LC‑20AB高效液相色谱仪工作站，设置A泵和B泵的流动相中无水甲醇和去离子水的体积比为9:1，流速为1.0毫升/分钟，保留时间为35分钟，柱温为40℃，待基线平稳，进入工作状态；(2)标准曲线绘制：称量剑麻皂苷元标准品，用无水甲醇定容于容量瓶中，分别制成剑麻皂苷元含量为50、100、200、300、500、1000和2000微克/毫升的溶液，分别注入步骤(1)设置的进入工作状态的HPLC装置的色谱柱10微升，分别计算同一保留时间下的峰面积，以含量x为横坐标，以峰面积y为纵坐标绘制标准曲线，作出标准曲线方程：y = f(x)，含量在50~2000微克/毫升范围；(3) 检测待测剑麻皂苷元样品中剑麻皂苷元的含量：将待测剑麻皂苷元样品注入步骤(1)设置的进入工作状态的HPLC装置的色谱柱10微升，计算同一保留时间下的峰面积，代入步骤(2)所得的标准曲线方程，即计算出待测剑麻皂苷元样品中剑麻皂苷元的含量；所述无水甲醇和去离子水均用0.45纳米微孔滤膜过滤，然后置于超声仪中超声60~120分钟；所述剑麻皂苷元标准品的纯度为市售色谱纯。