[发明专利]人白细胞介素29成熟肽第35位精氨酸定点突变为赖氨酸的变异体及其制备方法无效
| 申请号： | 201310028216.4 | 申请日： | 2013-01-25 |
| 公开（公告）号： | CN103224951A | 公开（公告）日： | 2013-07-31 |
| 发明（设计）人： | 陈伟;葛春蕾;郑海军;陆源;朱荣;邬敏辰;吴静 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/20;C12N1/19;C07K14/555;C12P21/02;C12R1/84 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种人白细胞介素29成熟肽第35位精氨酸定点突变为赖氨酸的变异体(hIL-29G)及其制备方法，属于生物工程领域。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工设计合成hIL-29成熟肽的上下游引物和定点突变引物；2)用上下游引物从hIL-29的cDNA扩增hIL-29成熟肽编码基因，再用突变引物对第104位碱基进行定点突变；3)构建含hIL-29变异体编码基因的重组真核表达载体，转化毕赤酵母，获得重组酵母工程菌；4)培养重组酵母工程菌，于培养液添加1.5％(v/v)甲醇诱导其表达hIL-29变异体；5)采用SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析从培养液上清纯化hIL-29变异体。本发明构建的酵母工程菌可进行高密度培养并分泌表达第35位精氨酸突变为赖氨酸的hIL-29突变体，适用于工业化制备人白细胞介素29成熟肽突变体。 | ||
| 搜索关键词： | 白细胞 29 成熟 35 精氨酸 定点 突变 赖氨酸 异体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种人白细胞介素29(hIL‑29)成熟肽变异体的重组真核表达载体，其特征在于，所述的重组真核表达载体中插入了人工定点突变的人白细胞介素29变异体的编码基因。
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