[发明专利]人白细胞介素29成熟肽第35位精氨酸定点突变为赖氨酸的变异体及其制备方法

说明书

技术领域

本发明提供了一种人白细胞介素29成熟肽第35位精氨酸定点突变为赖氨酸的变异体(hIL-29G)及其制备方法，属于生物工程领域。

背景技术

人白细胞介素29(interleukin29，IL-29)是近年发现的一种细胞因子，又称为干扰素λ1(interferonλ1，IFN-λ1)，其与IL-28A和IL-28B同属IFN-λ家族(IFNλs)。

人IL-29通过与细胞膜上的受体复合物结合，起始信号的转导和发挥生物学作用。IL-29的受体是一种异二聚体型II类细胞因子受体，由IL-10受体β亚基(IL-10R_β也称IL-10R₂)和一种II类孤儿受体链(即IL-28R_α)组成，其中IL-10R_β也是IL-10和IL-22受体组成部分，IL-28R_α或IFN-λR1则决定与IL-29结合的特异性，并且可能介导细胞内的信号传递。

人IL-29与I型干扰素共享相同的Jak-STAT信号传导途径，激活相同的Jak-STAT(janus kinase-signal transducer oftranscription)信号转导途径，促进一组共同的基因表达。IL-29首先与其受体结合，启动信号级联反应，经过多步磷酸化反应，激活STAT2，导致干扰素-激活基因因子3复合物(IFN-stimulated gene factor3complex，ISGF3)与干扰素激活反应元件(IFN-stimulated response element，ISRE)相互作用，从而调节基因的转录。因此，IL-29表现出一些与I型干扰素相同的性质，如抗病毒、抗增殖、体内抗肿瘤以及免疫调节等生物学活性。

人IL-29主要在上皮细胞中进行表达，在人血液、大脑、肺、胰脏及睾丸中也有低水平的表达。不同起源的造血和非造血细胞被各种病毒感染后，可诱导表达IL-29，目前已发现有麻疹病毒、腮腺炎病毒、心肌炎病毒、甲型流感病毒、仙台病毒、新城鸡瘟病毒、单链(+)RNA病毒、双链DNA病毒等可诱导感染细胞表达IL-29。

IFN是发现最早、研究最多、第一个克隆化和用于临床治疗疾病的细胞因子。目前，IFN主要用于某些肿瘤和病毒性疾病的治疗，但对不同的肿瘤和病毒性疾病的疗效差异很大，且常出现一些不良反应。IL-29的功能与I型IFN有一定相似，而且能选择性地作用于不同类型的靶细胞，它们可作为I型(IFN-α、IFN-β)或II型(IFN-γ)IFN的替代品或辅助品用于某些疾病的治疗，在肿瘤、器官移植、自身免疫性疾病及变态反应性疾病等防治方面具有潜在的应用价值。

分子识别是分子间专一性的结合过程，人们所熟悉的分子识别的三个模型包括抗体与抗原、配体与受体、酶与底物的结合。本发明中，以理论设计的IL-29变异体及野生型IL-29作为配体，采用计算机模拟与靶细胞表面的相应受体结合，预测变异体与受体间的非共价相互作用的结合自由能，根据结合自由能的正负来选择和确定定点突变位点。通过计算机模拟分析，发现IL-29成熟肽的35位精氨酸突变为赖氨酸时，该变异体与受体相结合的结合自由能低于野生型IL-29与受体相结合的结合自由能，由此选择对IL-29成熟肽的第35位氨基酸进行定点突变。

发明内容

本发明提供了一种人白细胞介素29成熟肽第35位精氨酸定点突变为赖氨酸的变异体(hIL-29G)及其制备方法。