[发明专利]一种闹羊花毒素Ⅲ单体的分离纯化方法

摘要

本发明提供了一种闹羊花毒素Ⅲ单体的分离纯化方法，属于中药活性成分的分离纯化技术领域。本发明是以杜鹃花科植物羊踯躅为原料，通过醇提取、采用乙酸乙酯萃取及通过制备型高效液相色谱分离、浓缩干燥后得闹羊花毒素Ⅲ单体。本发明通过最适宜的工艺及参数条件，使产品中闹羊花毒素Ⅲ的含量达到98%以上；整个工艺过程操作简便、工艺稳定、成本低，适合大量生产，且分离效率高、产品纯度高，即可实现大量闹羊花毒素Ⅲ单体的高纯度分离制备。

主权项

一种闹羊花毒素Ⅲ单体的分离纯化方法，其特征在于：以杜鹃花科植物羊踯躅药材为原料，通过提取、萃取、制备液相系统分离及干燥得闹羊花毒素Ⅲ单体，具体包括如下工艺步骤：A 提取将干燥的羊踯躅药材粉碎成1～4mm的粗粉，加入醇溶液，于60～100℃提取3～5次，每次1～3小时，提取液过滤，合并过滤液，60～90℃浓缩回收乙醇，得相对密度1.0～1.1的浓浸膏；B 萃取总毒素将步骤A所得的浓浸膏加水稀释至60℃时相对密度为0.7～0.9g/mL，然后加入等体积的乙酸乙酯萃取3～5次，分取上层溶液，45～60℃减压浓缩至干，所得固体物用质量/体积=10～15的甲醇超声溶解，并用0.45µm有机膜过滤，得澄清溶液；C 通过制备型高效液相色谱分离闹羊花毒素Ⅲ单体取步骤B所得的滤液进样，进行闹羊花毒素Ⅲ单体的制备分离，紫外检测器在线监测针对性收集闹羊花毒素Ⅲ的制备馏分溶液，得闹羊花毒素Ⅲ单体溶液；D 干燥制备闹羊花毒素Ⅲ单体产品取步骤D所得闹羊花毒素Ⅲ单体溶液，于45℃～75℃减压浓缩至干，再将固体物于45～85℃与另器盛放的五氧化二磷共存，真空干燥至恒重，收集干品，即得闹羊花毒素Ⅲ单体产品。