[发明专利]高特异高敏感检测副溶血性弧菌TDH毒素基因的方法

摘要

本发明公开了一种高特异高敏感检测副溶血性弧菌TDH毒素基因的方法，包括以下步骤：步骤1）制备反应液；步骤2）使用副溶血性弧菌TDH+菌株的核酸、TDH-菌株的核酸，以及若干临床分离金黄色葡萄球菌、头皮葡萄球菌、人型葡萄球菌、表皮葡萄球菌、草绿色链球菌、大肠杆菌、克雷伯菌的核酸，多次进行反应，观察它们的阴阳性。本发明通过配制反应液，设计引物序列，能快速、准确的检测副溶血性弧菌TDH毒素基因，并及时采取相应的措施，减少了疾病的发生率。

主权项

高特异高敏感检测副溶血性弧菌TDH毒素基因的方法,其特征在于，包括以下步骤：步骤1）制备反应液反应液组成及含量为8u/ul Bst核酸聚合酶                        8u10X耐热聚合酶反应缓冲液                1X,MgSO4 2mM4M 甜菜碱                                   1M10mM d‑NTP混合液                          400μM内引物   VPtdh‑FIP                               40umol   VPtdh‑BIP                               40umol外引物    VPtdh‑F3                               5umol    VPtdh‑B3                               5umol标本核酸                                   20ng添加焦碳酸二乙酯处理水至总量达到25ul;步骤2）使用副溶血性弧菌TDH+菌株的核酸、TDH‑菌株的核酸，以及若干临床分离金黄色葡萄球菌、头皮葡萄球菌、人型葡萄球菌、表皮葡萄球菌、草绿色链球菌、大肠杆菌、克雷伯菌的核酸，多次进行反应，观察它们的阴阳性。