[发明专利]一种检测WT1基因mRNA表达量的试剂盒

摘要

本发明涉及一种检测WT1基因mRNA表达量的试剂盒，属于生物技术领域。所述试剂盒包括检测用引物、荧光探针、cDNA第一链合成试剂、荧光定量PCR混合液、阴性对照和阳性对照，所述检测用引物、荧光探针包括WT1基因引物、内参基因ABL引物及Taqman荧光探针。WTl基因与造血系统肿瘤发病有关，约在80％的初诊急性髓细胞性白血病和急性淋巴细胞白血病患者中有过度表达，是公认的泛白血病标记基因，可以作为一个独立的微小残留病监测及预后提示指标。采用敏感性及特异性均较高的荧光定量PCR技术检测WT1mRNA水平，其检测结果的特异性和敏感度均显著提高。该试剂盒为预测急性髓系白血病和急性淋巴细胞白血病的预后以及化疗方案的确定提供了一种全新的快速简便的基因诊断技术。

主权项

一种检测WT1基因mRNA表达量的试剂盒，包括检测用引物、荧光探针、cDNA第一链合成试剂、荧光定量PCR混合液、阴性对照和阳性对照，其特征在于，所述检测用引物、荧光探针包括WT1基因引物、内参基因ABL引物及Taqman荧光探针，其中：WT1基因上游引物序列如序列表中SEQ ID NO:1所示；WT1基因下游引物序列如序列表中SEQ ID NO:2所示；WT1基因Taqman荧光探针如序列表中SEQ ID NO:3所示；ABL基因上游引物序列如序列表中SEQ ID NO:4所示；ABL基因下游引物序列如序列表中SEQ ID NO:5所示；ABL基因Taqman荧光探针如序列表中SEQ ID NO:6所示；所述cDNA第一链合成试剂含有MgCl2、逆转录酶缓冲液、dNTPs、RNA酶抑制剂、Oligo(dT)15、AMV逆转录酶和无RNase去离子水；所述荧光定量PCR混合液含有PCR预混合液、Mg2+、dNTPs、dUTP、Taq酶、UNG酶和无RNase去离子水。