[发明专利]一种电离辐射致外周血淋巴细胞DNA损伤的评价方法

摘要

本发明涉及一种电离辐射致外周血淋巴细胞DNA损伤的评价方法。该方法主要利用电离辐射照射外周血，采用特异性抗体标记外周血淋巴细胞和粒细胞中γ-H2AX蛋白质，通过流式细胞术分析两种细胞中γ-H2AX蛋白质的含量，并以粒细胞作为参照，计算淋巴细胞中γ-H2AX蛋白质的相对含量。采用γ-H2AX的RL/G值(淋巴细胞的γ-H2AX蛋白质含量与粒细胞中γ-H2AX蛋白质含量的比值)来评价电离辐射后外周血淋巴细胞DNA损伤程度。该方法操作简单，结果稳定，可以广泛应用于诊断、细胞生物学研究等领域。

主权项

一种电离辐射致外周血淋巴细胞DNA损伤的评价方法包括下列步骤：1)外周血样品有核细胞的固定；2)洗涤细胞，去除固定液；3)加入破膜剂对有核细胞破膜，裂解红细胞；4)洗涤细胞，去除破膜剂；5)加入荧光标记的抗γ‑H2AX蛋白质的特异性抗体；6)洗涤细胞，去除未结合的抗体；7)流式细胞仪检测样品中淋巴细胞对应的荧光强度值，即为淋巴细胞的γ‑H2AX蛋白质的含量；8)流式细胞仪检测样品中粒细胞对应的荧光强度值，即为粒细胞的γ‑H2AX蛋白质的含量；9)计算步骤7)中淋巴细胞的γ‑H2AX蛋白质含量与步骤8)中粒细胞中γ‑H2AX蛋白质含量的比值一一γ‑H2AX的RL/G值；10)DNA损伤程度的判断方法γ‑H2AX的RL/G值＜1.5为正常；γ‑H2AX的RL/G值＞1.5为DNA损伤，γ‑H2AX的RL/G值越大，DNA损伤越严重。