[发明专利]一种电离辐射致外周血淋巴细胞DNA损伤的评价方法有效
申请号: | 201210379982.0 | 申请日: | 2012-10-10 |
公开(公告)号: | CN102914495A | 公开(公告)日: | 2013-02-06 |
发明(设计)人: | 王治东;陈英;张学清 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 |
主分类号: | G01N15/14 | 分类号: | G01N15/14 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100850 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 电离辐射 致外周血 淋巴细胞 dna 损伤 评价 方法 | ||
1.一种电离辐射致外周血淋巴细胞DNA损伤的评价方法包括下列步骤:
1)外周血样品有核细胞的固定;
2)洗涤细胞,去除固定液;
3)加入破膜剂对有核细胞破膜,裂解红细胞;
4)洗涤细胞,去除破膜剂;
5)加入荧光标记的抗γ-H2AX蛋白质的特异性抗体;
6)洗涤细胞,去除未结合的抗体;
7)流式细胞仪检测样品中淋巴细胞对应的荧光强度值,即为淋巴细胞的γ-H2AX蛋白质的含量;
8)流式细胞仪检测样品中粒细胞对应的荧光强度值,即为粒细胞的γ-H2AX蛋白质的含量;
9)计算步骤7)中淋巴细胞的γ-H2AX蛋白质含量与步骤8)中粒细胞中γ-H2AX蛋白质含量的比值一一γ-H2AX的RL/G值;
10)DNA损伤程度的判断方法
γ-H2AX的RL/G值<1.5为正常;γ-H2AX的RL/G值>1.5为DNA损伤,γ-H2AX的RL/G值越大,DNA损伤越严重。
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