[发明专利]冬凌草纳米微粒的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种冬凌草纳米微粒的制备方法，主要是将冬凌草提取物采用超临界CO2抗溶剂技术处理。本发明还公开了通过本发明制备方法制得的冬凌草纳米微粒在治疗骨质疏松方面的应用。本发明因采用超临界CO2抗溶剂技术制备冬凌草纳米微粒，无需脱除溶剂残留、干燥、粉碎等后续处理工序，大大提高生产效率；整个过程中采用的CO2具有无臭、无毒、无污染、不易燃易爆的特点，使生产环境具有更高的安全性；产品中无溶剂残留，使产品品质具有更高的安全性。

主权项

一种冬凌草纳米微粒的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）将冬凌草与去离子水或无水乙醇中的一种或两种组合溶剂按1:1～20混合后，在回流提取温度为70℃～95℃下回流提取30min～300min，趁热过滤，得到滤渣和滤液；（2）将步骤（1）得到的滤液在60℃~90℃的条件下进行减压蒸馏浓缩至原体积的1/2～1/10；（3）将步骤（2）得到的浓缩滤液进行脱色、脱蛋白质处理，然后将处理液用95%乙醇调节至溶液中乙醇浓度为50%~60%，低温静置12~24小时，离心分离得到沉淀物和上清液；（4）将沉淀物用10~50倍的去离子水充分溶解，然后上凝胶柱进行层析，用超纯水洗脱，洗脱速度为0.1ml~1.0ml/min，用紫外分光光度法进行跟踪并收集洗脱液；（5）将步骤（4）的洗脱液与超临界CO2抗溶剂系统的液体泵相连；（6）启动超临界CO2抗溶剂系统，结晶釜的温度为40℃~80℃，结晶釜的压力为8Mpa~50Mpa，CO2的流量为30~300L/hr；（7）启动超临界CO2抗溶剂系统的夹带剂泵和步骤（4）中的液体泵，洗脱液与甲醇、乙醇、乙酸乙酯或丙酮中的一种夹带剂的进料比为10:1~1:10，洗脱液与夹带剂先混合后，经超临界CO2抗溶剂系统的纳米喷嘴喷入结晶釜中，流量控制在100ml~1000ml/hr；洗脱液中的溶剂和夹带剂进入分离釜中解析并分离，洗脱液中的溶质在结晶釜内析出为微细颗粒，该微细颗粒即为冬凌草纳米微粒。