[发明专利]冬凌草纳米微粒的制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种冬凌草纳米微粒的制备方法及其应用。

背景技术

冬凌草是唇形科茶菜属植物碎米桠变种，因其植株凝结薄如蝉翼、形态各异的蝶状冰凌片而得名，全株结满银白色冰片，风吹不落，随风摇曳，日出后闪闪发光，展现出神奇的自然景观，具有独到的观赏作用，具有清热解毒、消炎止痛、健胃活血之效，主要分布于河南及黄河流域以南，具有耐寒、耐旱、病虫害少等特点。

冬凌草的药用部位是全株，具有综合开发利用价值的植物。冬凌草味甘苦，性微寒，其中含有冬凌草甲素、冬凌草乙素、熊果酸、齐墩果酸、冬凌草多糖等多种功效成分，具有抗肿瘤、抗菌、抗炎、抗氧化和增强免疫力等作用。现代应用主治咽喉肿痛、扁桃体炎、气管炎、慢性肝炎、风湿痛，并对食管癌、乳腺癌、直肠癌等有缓解作用。中国发明专利申请其申请号201110288022.9，公布号CN102327318A，公布日2012.01.25，公开了冬凌草具有防治骨质疏松症的作用。

纳米中药制剂是指运用纳米技术制造的，粒径小于100nm的中药有效成分、有效部位、原药及其复方的制剂。与常规制剂相比，纳米制剂具有活性高、生物利用度高、良好缓控释性能以及靶向给药等特性。目前，可应用于中药制剂的纳米技术有很多，例如超细粉碎技术、喷雾干燥法、高压均质技术、化学沉淀法、界面聚合、乳化聚合等，但这些方法都有其应用的局限性。例如，超细粉碎技术不受中药溶解性能的限制，但是存在效率低、噪音大、生产量小等缺点；喷雾干燥法除了受溶解性限制外，其得到的颗粒不一定都是纳米级；化学沉淀法等化学方法会引入化学溶剂，对人体和环境产生危害。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供了一种冬凌草纳米微粒的制备方法，该纳米微粒制品应用于防治骨质疏松症方面，相对于常规剂型的冬凌草制品而言具有更加明显的效果。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一种冬凌草纳米微粒的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）将冬凌草与去离子水或无水乙醇中的一种或两种组合溶剂按1:1～20混合后，在回流提取温度为70℃～95℃下回流提取30min～300min，趁热过滤，得到滤渣和滤液；

（2）将步骤（1）得到的滤液在60℃~90℃的条件下进行减压蒸馏浓缩至原体积的1/2～1/10；

（3）将步骤（2）得到的浓缩滤液进行脱色、脱蛋白质处理，然后将处理液用95%乙醇调节至溶液中乙醇浓度为50%~60%，低温静置12~24小时，离心分离得到沉淀物和上清液；

（4）将沉淀物用10~50倍的去离子水充分溶解，然后上凝胶柱进行层析，用超纯水洗脱，洗脱速度为0.1ml~1.0ml/min，用紫外分光光度法进行跟踪并收集洗脱液；

（5）将步骤（4）的洗脱液与超临界CO₂抗溶剂系统的液体泵相连；

（6）启动超临界CO₂抗溶剂系统，结晶釜的温度为40℃~80℃，结晶釜的压力为8Mpa~50Mpa，CO₂的流量为30~300L/hr；

（7）启动超临界CO₂抗溶剂系统的夹带剂泵和步骤（4）中的液体泵，洗脱液与甲醇、乙醇、乙酸乙酯或丙酮中的一种夹带剂的进料比为10:1~1:10，洗脱液与夹带剂先混合后，经超临界CO₂抗溶剂系统的纳米喷嘴喷入结晶釜中，流量控制在100ml~1000ml/hr；洗脱液中的溶剂和夹带剂进入分离釜中解析并分离，洗脱液中的溶质在结晶釜内析出为微细颗粒，该微细颗粒即为冬凌草纳米微粒。

所述步骤（7）中的纳米喷嘴的口径为1～100nm；所述的分离釜温度为35℃～60℃，分离压力为4Mpa～7Mpa，优选分离釜温度为50℃，分离压力为5Mpa；所述的CO₂气体的纯度不低于99%。

所述的凝胶柱层析所用的填料为葡聚糖凝胶系列、琼脂糖凝胶系列或丙烯葡聚糖凝胶系列中的一种。