[发明专利]美丽鸡血藤EST-SSR标记无效

专利信息
申请号: 201210318966.0 申请日: 2012-09-03
公开(公告)号: CN102807986A 公开(公告)日: 2012-12-05
发明(设计)人: 李丽;李志英;徐立;黄碧兰;李克烈 申请(专利权)人: 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12Q1/68
代理公司: 海口翔翔专利事务有限公司 46001 代理人: 刘清莲
地址: 57173*** 国省代码: 海南;66
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摘要: 发明公开了一种美丽鸡血藤EST-SSR分子标记,主要包括:美丽鸡血藤EST序列的获得及预处理、EST序列中SSR位点的筛选、EST-SSR引物的设计、合成与引物筛选。从1573条EST序列中搜索到62条含不同简单序列重复单元的、符合条件的序列;筛选得到24个多态性丰富的EST-SSR分子标记Ndl_001、Ndl_002、Ndl_003、Ndl_004、Ndl_010、Ndl_011、Ndl_013、Ndl_015、Ndl_019、Ndl_020、Ndl_021、Ndl_022、Ndl_028、Ndl_031、Ndl_032、 Ndl_033、Ndl_038、Ndl_042、Ndl_043、Ndl_047、Ndl_049、Ndl_050、Ndl_051、Ndl_053。本发明可应用于美丽鸡血藤及近缘物种的遗传多样性评价,鸡血藤属植物种间和居群间的变异和进化关系的研究、种质鉴定和分子标记辅助育种,重复性好、可靠性高,是一种非常有效的分子标记。
搜索关键词: 美丽 鸡血藤 est ssr 标记
【主权项】:
美丽鸡血藤EST‑SSR标记,其特征在于:所述的微卫星标记编号为:Ndl_001、Ndl_002、Ndl_003、Ndl_004、Ndl_010、Ndl_011、Ndl_013、Ndl_015、Ndl_019、Ndl_020、Ndl_021、Ndl_022、Ndl_028、Ndl_031、Ndl_032、 Ndl_033、Ndl_038、Ndl_042、Ndl_043、Ndl_047、Ndl_049、Ndl_050、Ndl_051、Ndl_053;其核苷酸序列分别为:Ndl_001:ctcactcgta gccgttccgc tatcctcagc ataagcatct cgacacattc gatctctaga        60atcttcttat tatccttctt tatctttcta ctatggcttg ctccaccgtt gtgttgatgc       120tagtcgctgc attgttggtg agctccaccg ttgctcaatc tctggcatcg tcgccggctt       180cgtctcccac caactcgcct gtggccactc cgccgaagtc ttctcactct ccggcgccgg       240tgatttctcc gtccgctagt tcaccggcgg catctcctcc tgctccggtg gagagcggtc       300cctctccttc gcctgccgcc gtcaactctc cgccatctcc tcctccggct gcctctgcgt       360cgccagctgg cactccttcg gtcactccct cttcgatctc cagtccgcca tctgaagcac       420catcaccaag ccaaaacgac gccgctttga acagattcac cgtcgccgga tctgctgctg       480ttgtggtttt cgctgcggct ttgctgatgt agagagagag agagagagag agagagacag       540agttacttgg agtcaataat tttcttcctt ttttttaatt ctatattcac gaaattatat       600ggatcgtgaa cccttgtacc tcatttttgg ttgctcttct cagtgtgacg attcattctt       660tcgattattt tctgtattct atttattatt ctatga                                 696Ndl_002:ggaagactcg gagtgattga tggaggcaat gctttcaatc aatttgttgg tgtagagttc        60gatagttatg tcaatgggtg ggatccgaat tctgcacata ttggaatcga cgtcaactct       120ttgatttcgt tgaagacagt gaaatggaac agggtgagtg ggtcattggt ccaagtgagc       180ataatctatg actctctgtc taagacattg agtgttgctg tgactgacaa gaatggtcaa       240atttctaccg ttgctcaagt cgttgatttg aaagctgtgc tcccggagaa ggtcaaggtt       300ggtctatctg ctgccacatc ttcgggcggc cgtcaaagac acgacatcca ttcatggtct       360ttcacttcaa acttggagac ggctacactc agcaccgcgg agaacgcaaa tattgcaagc       420tatgcatgat tcctggtccg tcaaatgtgg cttgtgataa ctagtatttc taaataaagg       480ccatatatct agtcaatata tatatatata tatatgtgtg tgtgtgtgtt tgagtccatg       540catgttgctt aaattttggc tactcaactt atgcaaggtg ggtggttgaa aatggaatta       600tgtttgtcct actcgaa                                                      617Ndl_003:gcacccccca ctcccttccc ctctctctcc tattatcgct tccgtacaac aaatcatgtg        60agattactgc ttaccgtctc taatctctac cctctccttg cccagtattt ggtggtgtaa       120tcatcgctag ccagctcttc cttcacaatc ctccaaaaaa cacccttccc acttcgacat       180ctcttagcta gatttcaaca taaatgaaat tttacttatg cagctgaagg tgtcttccat       240accataatat atatatatat atccattata tatcaaaata ttagttttta gggttttaag       300ttgtgcacct ttctacgaat ttgaaataat taaaggatta tgctagtagt acctgttgat       360tgaagaagct cttgttcagc tgggttagat atagttgagt gagagagttt tgatttctaa       420gtggaaaaat taaatggagg aatacaccag taatcacatg agcgaaaaca caagtccaag       480tccaagggca aatttgttct actccccggc cggtgattca agcgtaggaa accggcatca       540tgactttccc atcaacaact ttcatcttca attgggtgga tcggatcact gctttcaatc       600tgatcaagta ccacaccctt ccgtgaaaac cgagtccaac aactcgcagc tccaccctcc       660tattttccac tatccgctga tgatgagagg aaatct                                 696Ndl_004: gaatccggca cgaggctttc ccacactctg cagcaacgta actgcttctc ccaaattacc        60aaaaaaacaa aagagaaata aatatttagt aagaattagt tacgtgacgt gttattatta       120tggcgccgag ggataagacg ggtggcgtta aggtgaacgg caacggtaac ggcggcgtga       180aggaggtgca ttttcgggga gtgaggaaga ggccgtgggg gagatacgcc gcggagatca       240gagatcccgg caagaagagc cgcgtttggc tcggcacctt tgacacggcg gaagaggcgg       300cgcgagccta cgacgccgcc gcacgcgagt tccgcggccc caaggccaaa accaacttcc       360ccttcccttc cgacaatgtc aagatccaga gccccagcca gagcagcacc gtcgaatcct       420ccagccgcga ccgcgacgcc gccgccgccg ccgccgattc ctccccgctc gacctcaact       480tggcccccgc cgccgtcgcc gcccccgttc ggttcccctt ccagcatcag ttcccgccga       540tgccgcccgc aaaccaggcg ttttacttcg acgccgtcct acgctccggc atgctgggtt       600cccttccgtg ccagggcttc gggttcaatt ataaccaccc cgtggcggcg agtgagtttc       660acgcgacggc gggagcgcaa agcgactcg                                         689Ndl_010:cggcgacgcc gttactgcgg ggacccaagg agatgaaagc ggggcagcgg acgtagaggt        60ggtaacggcc ggagatgaag gcgccaacct tccaacggac cctgccgtca atcttgacgg       120tgacgaggac gttaccgttg gactggtcct gagtgaggcc cacgaagttg aagggggcga       180cggggacgtc ggtgccgtag acaaacggcg accaaacgtc gacctctttg tggccttggt       240aagagggagg gatggcggtg cggtaagtga cctgctggct ccggtaactg acgtaggtgt       300cgagacggtc gtagtagact ccgatgtggt cgttggggtt gcgcgaggag agggtgactt       360ggaagttgga ggttaagaag tttggtacgg tggcgttgaa ggcgtaaacg gtgacgtctt       420ggaggatgaa ggatggcttg gagggtctta ggattgccca tatgagaagg attgctacga       480ggacgatgaa gaggaatact atgattcccc agaatatgcg ccggaagatc ctcctcttcc       540tccccttgtg gtgctcgcac tccttcaccg acatgattat gcgctcttct tcttcttctt       600tattttttaa ggtgaagtga aagtgaagag tgggggcgag tgtgtttagc tgaaactatc       660tatgaagaat aattaagata ttgattggga caagagcggg ggactagaag tctagaagtg       720aggagcaacg gcagaggaaa ttatagaatg attttgtttg tgaggggaag gaattatggg       780gaggtttcg                                                               789Ndl_011:caatctagat tctaaaacca gcgaatgagg cccaagtcca actactatgt acaggaacaa        60attaatccca actaactgaa aaaagaggga aaaaaaaaaa actacggagt aattaatttg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