[发明专利]肝素钠的共振光散射检测方法

摘要

本发明公开了一种肝素钠的共振光散射检测方法，在NaOH浓度为0.042mol/L的碱性条件下，Co(II)与钴试剂结合生成的配合物带正电荷，肝素钠带负电，二者通过静电结合形成三元复合物，使共振光散射强度显著增大，最大散射峰位于550nm，散射强度与肝素钠浓度在0.05-1.60μg/mL范围内呈良好的线性关系，检出限(3σ)为1.3ng/mL，所需检测设备简单、试剂易得、易于操作、检测时间短、线性范围较宽、灵敏度较高。本发明丰富了肝素钠的检测方法，利于满足不同条件下的检测需求。

主权项

肝素钠的共振光散射检测方法，其特征在于，包括以下步骤：a．标准曲线的制作a1．在反应容器中加入Co(II)的水溶液和钴试剂的无水乙醇溶液，混匀，再加入NaOH的水溶液，混匀，再加入肝素钠的水溶液，用水稀释制成含有2.0×10‑5 mol/L Co(II)、4.0×10‑5 mol/L 钴试剂、0.042 mol/L NaOH和肝素钠浓度在0.05~1.60 μg/mL范围内呈梯度的系列标准溶液；a2．按照步骤a1所述方法配制不加入肝素钠的空白对照溶液；a3．取步骤a1配制的系列标准溶液，用荧光分光光度计在220‑700 nm范围内、激发波长等于发射波长、狭缝10 nm的条件下进行同步扫描，获得共振光散射光谱，测定550nm处的散射强度，记为I；另取步骤a2配制的空白对照溶液，同法测定550nm处的散射强度，记为I0；按照公式△I550= I‑I0计算△I550，制作△I550对肝素钠浓度的标准曲线；b．样品测定b1．在反应容器中加入Co(II)的水溶液和钴试剂的无水乙醇溶液，混匀，再加入NaOH的水溶液，混匀，再加入未知肝素钠含量的样品的水溶液，用水稀释制成含有2.0×10‑5 mol/L Co(II)、4.0×10‑5 mol/L 钴试剂、0.042 mol/L NaOH和未知肝素钠浓度的待测溶液；b2．按照步骤b1所述方法配制不加入肝素钠的空白对照溶液；b3．取步骤b1配制的待测溶液，用荧光分光光度计在220‑700 nm范围内、激发波长等于发射波长、狭缝10 nm的条件下进行同步扫描，获得共振光散射光谱，测定550nm处的散射强度，记为I；另取步骤b2配制的空白对照溶液，同法测定550nm处的散射强度，记为I0；按照公式△I550= I‑I0计算△I550，再依据步骤a3获得的△I550对肝素钠浓度的标准曲线，计算出样品中肝素钠的含量。