[发明专利]利用HPLC测定葡萄和柑橘果实中17种酚类物质的方法

摘要

本发明公开了一种利用HPLC测定葡萄和柑橘果实中17种酚类物质的方法，首先将柑橘或葡萄的果皮和果肉分开，干燥粉碎后加入DMSO：甲醇（1:1）或甲醇溶液提取，收集上清液后重复提取合并上清液，进行HPLC检测。根据不同品种，不同产地所测的多种酚类物质含量分析，依据不同化合物含量对品种进行识别。本发明采用HPLC同时分离测定17种酚类物质，并达到对不同水果品种如柑橘、葡萄及其酒中17种化合物的组成和含量的测定，此方法样品前处理简单，成本低，可同时测定果实、果汁和果酒中酚类物质组成和含量进行测定。

主权项

一种利用HPLC测定葡萄和柑橘果实中17种酚类物质的方法，其特征在于：葡萄酚类的测定方法包括以下步骤： （1）标准品：没食子酸、儿茶素、表儿茶素、绿原酸、咖啡酸、丁香酸、香豆酸、芦丁、阿魏酸、苯甲酸、橙皮苷、柚皮苷、水杨酸、槲皮素、白藜芦醇、川陈皮素、桔皮素购自sigma公司；（2）样品前处理称取2‑3g冻干果实样品，加入质量分数为50%的乙醇研磨，用乙酸乙酯萃取2次，收集萃取液，减压浓缩至干，加入2ml甲醇与DMSO的体积比为1:1的混合溶液溶解；（3）色谱条件色谱柱Merck LiChrospher_100RP18e，250mm×4.0mm；检测波长：0‑20min:230nm；20‑35min:280nm；35‑42min:309nm；42‑60min：320nm；柱温：30℃；梯度洗脱：流动相A为水﹕乙酸=98﹕2；流动相B为乙腈；洗脱程序：0min→100min，乙腈：16%→70%，2%醋酸水混合液：84%→30%；流速：0.8ml/min。