[发明专利]一种新的单克隆抗体的制备方法及用途无效
| 申请号： | 201210130232.X | 申请日： | 2012-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN103374068A | 公开（公告）日： | 2013-10-30 |
| 发明（设计）人： | 孙兵;伊春艳;边超;凌志洋 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 主分类号： | C07K16/00 | 分类号： | C07K16/00;C07K16/06;C12N15/85;C12N15/63;G01N33/543;A61K48/00 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200031 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种新的单克隆抗体的制备方法及用途。揭示了一种获得高抗体滴度的DNA疫苗免疫方法和基于哺乳动物细胞内目的蛋白特异位点生物素化的表达系统，开发了一种抗原需求量极低的酶联免疫方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 单克隆抗体 制备 方法 用途 | ||
【主权项】：
一种筛选单克隆抗体的方法，包括：(1)提供构建物1，该构建物1包括：表达盒1，其包括启动子1、生物素连接酶BirA编码基因、终止子1；和表达盒2，其包括启动子2、AviTag编码基因、抗原编码基因、终止子2；将构建物1转染哺乳动物细胞，表达获得生物素化的抗原，裂解细胞获得含有生物素化抗原的裂解液；(2)提供构建物2，该构建物2包括：表达盒3，其包括启动子3、信号肽编码基因、GM‑CSF编码基因、终止子；和表达盒4，其包括启动子4、信号肽编码基因、抗原编码基因；将构建物2免疫哺乳动物，取哺乳动物脾脏细胞制备杂交瘤细胞；(3)将步骤(1)获得的含有生物素化抗原的裂解液与包被有亲和素的固相载体接触，从而生物素化的抗原被固定于固相载体；以该生物素化的抗原来筛选步骤(2)获得的杂交瘤细胞分泌的抗体，获得特异性抗所述抗原的单克隆抗体。
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