[发明专利]一种重组戊型肝炎疫苗抗原P179蛋白的发酵制备方法有效
申请号: | 201210129184.2 | 申请日: | 2012-04-28 |
公开(公告)号: | CN102643887A | 公开(公告)日: | 2012-08-22 |
发明(设计)人: | 时成波;曹玉锋;徐军 | 申请(专利权)人: | 长春生物制品研究所有限责任公司 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C12R1/19 |
代理公司: | 深圳市君胜知识产权代理事务所 44268 | 代理人: | 王永文 |
地址: | 130062 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明公开了一种重组戊型肝炎疫苗抗原P179蛋白的发酵制备方法,包括以下步骤:A,培养工程菌株,并制备基础培养基和补料培养基;B,灭菌处理后,接入工程菌株;C,监测所工程菌株的OD600值,当OD600的值为40~80时,加入诱导剂进行诱导;D,当所述OD600的值至少提高百分之五时,进行收菌;E,离心提纯后,即得P179蛋白;在整个过程中实时监测基础培养基中葡萄糖的含量,当葡萄糖的含量少于预定值时,增加补料培养基。本发明通过大肠杆菌HEV179/BL21(DE3)以可溶性形式表达重组戊型肝炎疫苗抗原P179蛋白,并可自主包装成粒径为18~20nm的VLP颗粒。所述VLP颗粒具有良好的免疫原性。该发酵工艺稳定、简单、易于产业化。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 肝炎 疫苗 抗原 p179 蛋白 发酵 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种重组戊型肝炎疫苗抗原P179蛋白的发酵制备方法,包括以下步骤:A,培养工程菌株,并制备基础培养基和补料培养基;B,所述基础培养基经过灭菌处理后,接入所述工程菌株;C,监测所述工程菌株的细菌细胞密度OD600,当所述OD600的值为40~80时,在基础培养基中加入诱导剂进行诱导;D,当所述OD600的值至少提高百分之五时,进行收菌;E,离心提纯后,即得P179蛋白;在所述步骤B~D过程中,实时监测基础培养基中葡萄糖的含量,当葡萄糖的含量少于预定值时,增加补料培养基,使得葡萄糖的含量等于或大于所述预定值。
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