[发明专利]一种在PET基材表面制备蛋白微图案的工艺

摘要

本发明涉及一种在PET基材表面制备蛋白微图案的工艺，首先在PET基材表面制备金属银微图案，将带有金属银微图案的PET基材浸泡在SHPEG水溶液中，镀银区域就吸附上排斥蛋白质的SHPEG，而未镀银区域仍然保留基材具有吸附蛋白质的本性，从而在PET基材上制备出蛋白微图案，控制蛋白质在PET基材表面的选择性吸附。本发明的PET基材表面的蛋白微图案，可用于表面生物诊断，制作生物传感器和生物医学器件等。该PET基材表面的蛋白微图案，也为下一步进行组织工程的研究奠定了一定的基础。同时，该PET基材表面的蛋白微图案的制备工艺简单，制备过程易于控制，成本低廉，蛋白微图案保真性好，并且具有良好的可重复性。

主权项

一种在PET基材表面制备蛋白微图案的工艺，其特征在于包括有以下步骤:1）巯基聚乙二醇的吸附：将表面带有金属银微图案的PET基材浸入10~20 mL浓度为0.01~0.1 g/mL的SHPEG溶液中，用手轻摇10 ~20 min，取出表面带有金属银微图案的PET基材，用蒸馏水超声清洗3~6次，每次5~10 min ，氮气吹干得到吸附了SHPEG的表面带有金属银微图案的PET基材，保存在真空干燥箱中，备用；所述的表面带有金属银微图案的PET基材的制备方法是：将光掩膜固定在清洗干净的PET基材表面，置于165 ~195 nm 的紫外光灯下，光照时间为10~20 min ，将光照后的PET基材置于镀银溶液中，待PET基材表面出现光亮的镀银层后，取出PET基材，用蒸馏水冲洗3~5次，并用氮气吹干得到表面带有金属银微图案的PET基材，保存在真空干燥器中，备用；2）FITC标记BSA的吸附：取BSA溶解在NaHCO3缓冲溶液中得到BSA溶液，将5 ~10 mg的FITC溶解于5 ~15 mL DMSO中，取120~180 μL得到的FITC/DMSO溶液逐滴缓缓加入到1~2 mL所得的BSA溶液中，边加入边轻微震荡，之后在‑4 ~8 ℃的环境下反应6 ~10 h ，加入0.00545 ~0.00595 g NH4Cl使反应结束，之后再在上述溶液中加入0.1 ~0.5 mL 的丙三醇，震荡5 ~10 min ，以分离出未吸附的FITC，再将溶液超滤，从而得到浓缩的FITC标记的BSA溶液；将吸附了SHPEG的表面带有金属银微图案的PET基材放入24孔板中，且金属银微图案一面向上，加入0.15 ~ 0.30 mL FITC标记的BSA溶液，室温下在摇床上轻轻地摇动，吸附2 ~3 h ，吸出FITC标记的BSA溶液，用0.15 ~0.30 mL 的PBS缓冲溶液在摇床上摇动清洗3~5次，每次10 ~15 min ，所述的PBS缓冲溶液的配制方法是：分别称取15~20 g 的NaCl，0.6 ~1.0 g 的NaH2PO4，2 ~5 g 的Na2HPO4，溶解在1.5~2.5 L去离子水中，即得PBS缓冲溶液；即可在PET基材表面制备出蛋白微图案。