[发明专利]截短的细粒棘球蚴EG95蛋白重组毕赤酵母高密度发酵工艺无效
申请号: | 201210103719.9 | 申请日: | 2012-04-10 |
公开(公告)号: | CN102732436A | 公开(公告)日: | 2012-10-17 |
发明(设计)人: | 贾万忠;娄忠子;闫鸿斌;李宏民;倪兴维 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | C12N1/16 | 分类号: | C12N1/16;C12P21/02;C12R1/84 |
代理公司: | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人: | 张晋 |
地址: | 730046 *** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 本发明公开一种截短的细粒棘球蚴EG95蛋白的tEG95重组毕赤酵母高密度发酵方法。本发明所使用的重组酵母工程菌单克隆EG95-1菌株系发明人构建并鉴定,并于2012年02月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No5764。本发明的发酵方法是将发酵工作种子液转接于BSM液体培养基,调整培养基pH到5.5开始增菌,增菌过程补加含甘油和PTM1的水溶液,再在培养体系中分阶段加入含PTM1的甲醇溶液的溶液进行蛋白诱导表达。 | ||
搜索关键词: | 细粒 棘球蚴 eg95 蛋白 重组 酵母 高密度 发酵 工艺 | ||
【主权项】:
截短的细粒棘球蚴EG95蛋白的tEG95重组毕赤酵母高密度发酵方法中发酵前的工作种子培养方法,其特征在于:挑取1个重组酵母工程菌EG95‑1的单克隆于YPD液体培养基中,培养至菌液OD600为5.0左右,得到一级种子培养液;再将上述培养液转接BMGY培养基,培养至菌液浓度OD600达到40.0左右,得到发酵工作种子液,上述培养过程均在28℃下进行,其中的重组酵母工程菌EG95‑1单克隆菌株于2012年02月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No5764。
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