[发明专利]鉴别71型和非71型肠道病毒的单管二重一步法RT-PCR引物及其应用有效

专利信息
申请号: 201210086272.9 申请日: 2012-03-29
公开(公告)号: CN102559939A 公开(公告)日: 2012-07-11
发明(设计)人: 孟继鸿;江炳福;张建华;戴星 申请(专利权)人: 东南大学
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 李纪昌
地址: 210096 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 鉴别71型和非71型肠道病毒的单管二重一步法RT-PCR引物及其应用。本发明提供的二重一步法RT-PCR引物包括肠道病毒通用引物TACTTCGAGAARCCTAGTAWCACC和ACGGACACCCAAAGTAGTCGGTTC,以及肠道病毒71型(EV71)特异性引物CCCAACACAGCYTAYATAATAGC和GTAYCCAYGCCCTGACGTGYTTC。通用引物用于扩增所有肠道病毒5’UTR基因,特异性引物用于扩增所有EV71VP1基因。本发明的优点:(1)两对引物同时在一个PCR管反应,快速简便,节省成本;(2)可早期鉴别EV71和非EV71型引起的手足口病;(3)检测灵敏度高,特异性好;(4)普通RT-PCR仪就能操作,易于推广。
搜索关键词: 鉴别 71 肠道病毒 二重 一步法 rt pcr 引物 及其 应用
【主权项】:
鉴别71型和非71型肠道病毒的单管二重一步法RT‑PCR引物,其特征在于同时包括肠道病毒5’UTR通用引物和EV71 VP1基因特异性引物,所述肠道病毒5’UTR通用引物为:引物F2:5’‑TACTTCGAGAARCCTAGTAWCACC‑3’ ;引物R1:5’‑ACGGACACCCAAAGTAGTCGGTTC‑3’ ;所述EV71 VP1基因特异性引物为:引物Fa: 5’‑CCCAACACAGCYTAYATAATAGC‑3’ ;引物Rb:5’‑GTAYCCAYGCCCTGACGTGYTTC ‑3’;其中R=A或G,W= A或T,Y=C或T。
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