[发明专利]一种猪α-干扰素的生产方法

摘要

本发明涉及的一种猪α-干扰素的生产方法属于治疗猪感染病领域，主要是提供了一个高效简单的干扰素分泌、分离纯化方法。其目的旨在简化生产工艺，降低生产成本，获得高活性、高稳定性重组猪α-干扰素产品。所提供的生产方法是：一是用甲醇的混合物生产干扰素；二是采用多效超滤提纯干扰素。根据干扰素分子量选择不同截留分子量的超滤膜做成过滤器，通过过滤使发酵液中大于干扰素分子量的杂蛋白和杂质、小于干扰素分子量的杂蛋白、无机盐以及水被出去，仅保留干扰素和少量的水，冷冻干燥得到的干扰素成品纯度高、活性高、稳定性好。

主权项

一种猪α‑干扰素的生产方法，其步骤包括：一、用甲醇的混合物生产干扰素第一步、备料：单克隆、甘油、甲醇的混合物；第二步、单克隆接种到一级种子液，培养17～20h；第三步、按XX：YY=1:10比例二级接种于三角烧瓶，培养4～8h；第四步、发酵pH5.0，温度20℃，DO＞35%，当溶氧上升到10～15后；转速加50%甘油，待甘油耗尽，溶氧再次上升后；第五步、甲醇的混合物诱导得到α‑干扰素用含甲醇的混合物以转速1开始诱导，诱导48h后，得到α‑干扰素；二、纯化α‑干扰素第六步、α‑干扰素液体经二级串联过滤器过滤，一级串联过滤器串接二级串联过滤器，一级串联过滤器滤膜孔径为0.45μm、二级串联过滤器滤膜孔径为0.22μm；第七步、滤液通过22KD超滤系统过滤；第八步、所得滤液再通过18KD超滤系统进行浓缩；第九步、冷冻干燥后得到的较纯的α‑干扰素。