[发明专利]一种猪α-干扰素的生产方法在审
申请号: | 201210061246.0 | 申请日: | 2012-03-09 |
公开(公告)号: | CN102559819A | 公开(公告)日: | 2012-07-11 |
发明(设计)人: | 王庆福;刘易通;李振天 | 申请(专利权)人: | 广东紫金正天药业有限公司 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C07K1/34;C12R1/84 |
代理公司: | 广州市红荔专利代理有限公司 44214 | 代理人: | 李彦孚 |
地址: | 517475 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 干扰素 生产 方法 | ||
1.一种猪α-干扰素的生产方法,其步骤包括:
一、用甲醇的混合物生产干扰素
第一步、备料:单克隆、甘油、甲醇的混合物;
第二步、单克隆接种到一级种子液,培养17~20h;
第三步、按XX:YY=1:10比例二级接种于三角烧瓶,培养4~8h;
第四步、发酵
pH5.0,温度20℃,DO>35%,当溶氧上升到10~15后;转速加50%甘油,待甘油耗尽,溶氧再次上升后;
第五步、甲醇的混合物诱导得到α-干扰素
用含甲醇的混合物以转速1开始诱导,诱导48h后,得到α-干扰素;
二、纯化α-干扰素
第六步、α-干扰素液体经二级串联过滤器过滤,一级串联过滤器串接二级串联过滤器,一级串联过滤器滤膜孔径为0.45μm、二级串联过滤器滤膜孔径为0.22μm;
第七步、滤液通过22KD超滤系统过滤;
第八步、所得滤液再通过18KD超滤系统进行浓缩;
第九步、冷冻干燥后得到的较纯的α-干扰素。
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