[发明专利]一种水产养殖生物和养殖环境中抗生素抗性菌株的鉴定方法无效
| 申请号： | 201210004542.7 | 申请日： | 2012-01-09 |
| 公开（公告）号： | CN102534002A | 公开（公告）日： | 2012-07-04 |
| 发明（设计）人： | 黄志坚;陈旭凌;何建国 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 陈卫 |
| 地址： | 510275 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种水产养殖生物和养殖环境中抗生素抗性菌株的鉴定方法，该方法是提取细菌的总DNA作为模板，SEQIDNO:1~2所示序列为引物，PCR扩增和16SrDNA序列分析鉴定菌株，同时以SEQIDNO:3~8所示序列为引物，进行测序鉴定，检测带有抗性基因的抗性菌株。本发明的方法针对水产养殖生物和养殖环境中的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有效，DNA提取无需使用特殊试剂，也无需用酚和氯仿等有毒试剂，安全环保，价格低廉，步骤简单，耗时短，结果稳定可靠，PCR产物的扩增阳性率高。运用16SrDNA鉴定菌种和检测抗性基因，DNA图谱信息度高、实用性强、简便快速，结果准确、稳定、重复性好、灵敏度高，具有十分广阔的应用前景、有很高的理论研究意义和实用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 水产 养殖 生物 环境 抗生素 抗性 菌株 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
一种水产养殖生物或水产养殖环境中抗生素抗性菌株的鉴定方法，其特征在于步骤如下：（1） 细菌总DNA的提取：提取水产养殖生物或水产养殖环境样品里细菌总DNA；（2） 以步骤（1）所得总DNA为模板，SEQ ID NO:1~2所示序列为引物， PCR扩增和分析16S rDNA序列，进行测序，鉴定菌株的种属名称；（3）经过种属鉴定的菌株进一步测序鉴定，检测带有抗生素抗性基因的菌株，所述抗生素抗性基因为耐氯霉素基因floR、耐磺胺类基因sul1，和/或耐磺胺类基因sul2。
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