[发明专利]用于RT-PCR反应缓冲液中的细胞裂解的方法在审
| 申请号： | 201180048150.4 | 申请日： | 2011-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN103154270A | 公开（公告）日： | 2013-06-12 |
| 发明（设计）人： | I.霍夫曼;H.瓦尔克 | 申请（专利权）人： | 霍夫曼－拉罗奇有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 权陆军 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 瑞士;CH |
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| 摘要： | 本发明一般而言提供了用于扩增靶RNA的方法，其包括步骤（i）将包含至少一个或多个活细胞的具有第一体积的液体转移到容器内，（ii）向所述容器中加入具有第二体积的RT-PCR反应缓冲液，其中所述第二体积是所述第一体积至少2x大，（iii）通过在至少90℃温育至少20秒，裂解所述容器内的所述至少一个或多个活细胞，以及（iv）通过一步RT-PCR而不执行中间纯化步骤扩增所述靶。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 rt pcr 反应 缓冲液 中的 细胞 裂解 方法 | ||
【主权项】：
用于扩增RNA靶核酸的方法，其包括步骤a）将包含一个或多个活细胞的具有第一体积的液体样品转移到容器内，b）向所述容器中加入具有第二体积的一步RT‑PCR反应缓冲液，其中所述第二体积是所述第一体积至少2x大，c）将所述容器在至少90℃加热至少20秒，d）用能够执行一步RT‑PCR的热稳定的DNA聚合酶通过聚合酶链反应扩增所述容器中的所述靶，而不执行中间纯化步骤，其中在步骤b）过程中加入的所述一步RT‑PCR反应缓冲液包含能够执行一步RT‑PCR的热稳定的DNA聚合酶，和dNTPs。
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