[发明专利]重组人寡腺苷酸合成酶-1的制备方法

摘要

本发明属于生物医药领域，涉及重组人寡腺苷酸合成酶-1（OAS1）的制备方法，依次包括步骤：1）化学合成OAS1蛋白基因表达序列；2）构建表达OAS1蛋白的重组工程菌；3）发酵培养产生包涵体形式表达的OAS1；4）获得包涵体并对其依次用含从低到高浓度的1-8mol/L的尿素的溶液进行洗涤，含每种浓度的尿素的溶液洗涤1次，共洗涤2-4次后用含6-8mol/L盐酸胍与同下步阳离子交换层析相同缓冲溶液体系的溶液进行变性处理；5）变性液上阳离子交换层析柱进行纯化处理，洗脱后得到纯度在95%以上的OAS1变性蛋白。采用该方法可在不添加有利于纯化的标签的情况下通过一步纯化原核表达系统表达的OAS1蛋白，使其纯度达到95%以上，更好的符合免疫与筛选抗体的需要。

主权项

一种OAS1蛋白的制备方法，其特征是依次包括如下步骤：1）化学合成OAS1蛋白基因表达序列；2）用适宜的表达载体和上述OAS1蛋白表达基因序列构建重组表达载体，并将重组表达载体通过适宜的手段转入基因工程工程菌构建表达OAS1蛋白的重组工程菌；3）发酵培养上述重组工程菌，通过适宜的方式产生包涵体形式表达的OAS1；4）对发酵培养收获的工程菌进行破碎处理后获得包涵体，对包涵体依次用含从低到高浓度的1‑8mol/L的尿素的溶液进行洗涤，含每种浓度的尿素的溶液洗涤1次，共洗涤2‑4次后用含6‑8mol/L盐酸胍与同下步阳离子交换层析相同缓冲溶液体系的溶液进行变性处理；5）变性液上阳离子交换层析柱进行纯化处理，洗脱后得到纯度在95%以上的OAS1变性蛋白。