[发明专利]一种光合细菌絮凝剂的制备方法

摘要

本发明涉及一种微生物絮凝剂的制备方法，公开了一种光合细菌絮凝剂的制备方法及其应用，经培养基培养，选用沼泽红假单胞菌(Rhodopseudanonaspalustris)为出发菌株，菌种保藏编号：CGMCC1.2181，先配制培养基，后经絮凝剂的提取，获得絮凝剂白色固体粉末成品。本发明的沼泽红假单胞菌不受环境影响而变异，性能稳定，该菌种所产絮凝剂储藏性能好，常温下(380C以下)储存一年，絮凝剂絮凝效率可达95%以上；以细菌培养液生产的沼泽红假单胞菌絮凝剂，方法简便，发酵周期短，成本低，适用于大规模生产。

主权项

一种光合细菌絮凝剂的制备方法，其特征在于，具体方法如下：选用沼泽红假单胞菌(Rhodop seudanonas palustris)为出发菌株，菌种保藏编号:CGMCC1.2181，保藏地点：中国普通微生物菌种保藏管理中心；a、配制培养基：1)菌种保藏培养基：(NH4)2SO4 1g，MgSO4﹒7H2O 0.2g，NaHCO3 5g，K2HPO4 0.5g，NaCl 0.2g，蛋白胨1.5g，蒸馏水加至1L，琼脂15.0g，pH7.0；105Pa灭菌15min；2)种子培养基：KH2PO$ 0.5 5%，CaCl2 0.01 0.5%，乙酸钠0.2 2.0%，葡萄糖0.1 1.0%，蛋白胨0.1 1.5%，MnCl﹒4H2O 0.1 1.0，蒸馏水加至1L，pH6.8，105(Pa)灭菌15 20min；3)发酵培养基：KH2PO$ 0.5 5%，CaCl2 0.01 0.5%，乙酸钠0.2 2.0%，葡萄糖1 10%，蛋白胨0.5 5%，蒸馏水加至1L,pH6.8，105Pa灭菌15 20min；b、微生物的培养和发酵条件：所述1) 菌种保藏培养基培养条件和保藏方法：在试管中加入未灭菌的培养基，约占试管的总量的1/3，灭菌后试管垂直放置在试管架上，冷却后放置一周，确认为无菌后，在无菌室中穿刺接入培养好的菌种，在300C和光照下培养2 4周，光照箱内，以40瓦的电灯对称照射，光照强度以1000勒克司左右为佳，培养成熟的标志是穿刺针周围产生红色菌落, 培养成熟后的固体培养基以灭菌的矿物油在无菌室中加入试管中, 矿物油高于培养基1cm，放在40C冰箱中保存；所述2)种子培养基培养条件: 种子培养基在灭菌后接入保藏培养基菌种, 在250C 350C通气培养15 40h，通气比为1:0.5 2.0；所述3)发酵培养基发酵条件：发酵培养基在灭菌后接入5 15%种子培养基的菌种，在250C 350C通气培养15 40h，通气比为1:0.5 2.0；c、絮凝剂的提取：培养成熟后的发酵液，以高速离心机在5000 10000r/min离心分离20 40min，分别收集清液和菌体，所述清液作为絮凝剂的制备液体；收集上述清液，加入1 3倍的无水乙醇，混合均匀后，在容器中静止8 10h，收集沉淀物，沉淀物再以4000 8000r/min离心分离20 40min，收集固体；d、絮凝剂成品制备：上述固体真空干燥，获得絮凝剂白色固体粉末成品，真空干燥的温度：600C±20C，真空度0.06MPa。