[发明专利]一种mbr-FPGS高效表达载体及其构建方法和应用有效
申请号: | 201110321613.1 | 申请日: | 2011-10-21 |
公开(公告)号: | CN102337297A | 公开(公告)日: | 2012-02-01 |
发明(设计)人: | 孙玉洁;胡文佳;韩晓 | 申请(专利权)人: | 南京医科大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/66;A61K48/00;A61P35/00;A61P35/02;A61K31/519 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 邱兴天 |
地址: | 210029 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种mbr-FPGS高效表达载体,质粒载体为pEGFP-C1,在pEGFP-C1的CMV启动子上游含有279bp长的mbr序列,在pEGFP-C1的HindⅢ和EcoRⅠ两个酶切位点之间含有FPGS的蛋白质编码区;其中,mbr序列如序列表2所示。所构建的mbr-FPGS高效表达质粒经WesternBlot实验、MTT实验测得IC50结果表明:mbr-FPGS高效表达质粒比FPGS对照质粒提高了FPGS的表达水平30%(p<0.05),mbr-FPGS高效表达质粒可以明显增强肿瘤细胞对MTX的敏感性,并具有一定的剂量-时间依赖性,mbr-FPGS高效表达组细胞IC50值(72h)为2.63ng/ml,约是对照组细胞IC50值(19.01ng/ml)的1/7(p<0.05)。 | ||
搜索关键词: | 一种 mbr fpgs 高效 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种mbr FPGS高效表达载体,其特征在于:质粒载体为pEGFP C1,在pEGFP C1的CMV启动子上游含有279bp长的mbr序列,在pEGFP C1的HindⅢ和EcoRⅠ两个酶切位点之间含有FPGS的蛋白质编码区;其中,FPGS序列为说明书核苷酸和氨基酸序列表的序列1,mbr序列为说明书核苷酸和氨基酸序列表的序列2。
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