[发明专利]肠道病毒三联实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒

摘要

本发明提供一种肠道病毒三联实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒，包含：定量RT-PCR反应液、标准品、对照品，其中定量RT-PCR反应液含有RT-PCR缓冲液、MgCl2、dNTPs、EV通用引物、EV通用型荧光探针、EV71型荧光探针、CA16型荧光探针、耐热DNA聚合酶、反转录酶。本发明试剂盒通过一步法同时对肠道病毒通用型、肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型进行检测分型，比现有的单个检测试剂盒，不仅节约了生产成本和检测成本，同时也提高了检测的效率和时间。并在保证没有多对引物竞争的条件下随机自动的达到多通道的检测目的，达到效率和技术的统一。

主权项

一种肠道病毒三联实时荧光定量RT‑PCR检测试剂盒，由定量RT‑PCR反应液（1）、标准品（2）、阳性对照品（3）、阴性对照品（4）和盒体（5）组成，其中定量RT‑PCR反应液（1）有RT‑PCR缓冲液、MgCl2 、dNTPs 、EV通用引物、EV通用型荧光探针、EV71型荧光探针、CA16型荧光探针、耐热DNA聚合酶、反转录酶，检测用上游引物序列为：  5`‑ CCCTGAATGCGGCTAATCC ‑3`检测用下游引物序列为：  5`‑ GATTGTCACCATAAGCAGCC‑3` EV通用型荧光探针序列为：5`FAM‑‑ACACGGACACCCAAAGTAGTCG–3`BHQ‑1EV71型荧光探针序列为：  5`HEX‑‑CACACGCCCACAAGCCAGC–3`BHQ‑1CA16型荧光探针序列为：  5`ROX‑‑CACGCACCCTCAACCCAGG–3`BHQ‑2标准品序列为：CCCTGAATGC  GGCTAATCCC  ACGCACCCTC  AACCCAGGCA ACTGCGGAGC  ACACGCCCAC  AAGCCAGCGG  GTAGTGTGTC GTAACGGGCA  ACTCTGCAGC  GGAACCGACT  ACTTTGGGTGTCCGTGTTTC  CTTTTATCTT  TATATTGGCT  GCTTATGGTG  ACAATC阴性对照为无菌注射用水样品，阳性对照为EV71型灭活病毒株样品。