[发明专利]肠道病毒三联实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒无效

申请号：	201110289047.0	申请日：	2011-09-26
公开（公告）号：	CN102367488A	公开（公告）日：	2012-03-07
发明（设计）人：	吴亦栋;尚世强;杜立中;陈志敏	申请（专利权）人：	浙江大学
主分类号：	C12Q1/70	分类号：	C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93
代理公司：	杭州求是专利事务所有限公司 33200	代理人：	张法高;赵杭丽
地址：	310027 浙***	国省代码：	浙江;33
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摘要：
搜索关键词：	肠道病毒三联实时荧光定量 rt pcr 检测试剂盒
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【权利要求书】：

1.一种肠道病毒三联实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒，由定量RT-PCR反应液（1）、标准品（2）、阳性对照品（3）、阴性对照品（4）和盒体（5）组成，其中定量RT-PCR反应液（1）有RT-PCR缓冲液、MgCl₂ 、dNTPs 、EV通用引物、EV通用型荧光探针、EV71型荧光探针、CA16型荧光探针、耐热DNA聚合酶、反转录酶，

检测用上游引物序列为： 5`- CCCTGAATGCGGCTAATCC -3`

检测用下游引物序列为： 5`- GATTGTCACCATAAGCAGCC-3`

EV通用型荧光探针序列为：5`FAM--ACACGGACACCCAAAGTAGTCG–3`BHQ-1

EV71型荧光探针序列为： 5`HEX--CACACGCCCACAAGCCAGC–3`BHQ-1

CA16型荧光探针序列为： 5`ROX--CACGCACCCTCAACCCAGG–3`BHQ-2

标准品序列为：

CCCTGAATGC GGCTAATCCC ACGCACCCTC AACCCAGGCA

ACTGCGGAGC ACACGCCCAC AAGCCAGCGG GTAGTGTGTC

GTAACGGGCA ACTCTGCAGC GGAACCGACT ACTTTGGGTG

TCCGTGTTTC CTTTTATCTT TATATTGGCT GCTTATGGTG ACAATC

阴性对照为无菌注射用水样品，阳性对照为EV71型灭活病毒株样品。

2.根据权利要求1所述的一种肠道病毒三联实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，试剂盒保存于-20℃，尽量减少反复冻融。