[发明专利]一种蜂王浆多肽及其用途有效

专利信息
申请号: 201110186939.8 申请日: 2011-07-05
公开(公告)号: CN102250233A 公开(公告)日: 2011-11-23
发明(设计)人: 冯成强;孙平;颜慧;李虎臣 申请(专利权)人: 北京师范大学;北京师大科技园科技发展有限责任公司
主分类号: C07K14/435 分类号: C07K14/435;C12P21/06;A61K38/17;A61P25/28
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 逯长明
地址: 100875 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明涉及生物医药技术领域,具体涉及一种蜂王浆多肽及其用途。本发明通过从蜂王幼虫体内提取肠道酶,模拟蜂王体内酶解环境对蜂王浆进行酶解得到3~5kDa的蜂王浆多肽,能够用于制备Aβ抑制剂。
搜索关键词: 一种 蜂王浆 多肽 及其 用途
【主权项】:
一种蜂王浆多肽,其特征在于,其由以下方法制备:步骤1:将2~3日龄的蜂王幼虫肠道,加入pH值为7.0~7.2的磷酸盐缓冲溶液或Tris‑HCl缓冲溶液研磨成匀浆,在18000~25000g,4℃条件下离心20~30min,收集第一次离心后的中层液体,然后在18000~25000g,4℃条件下离心20~30min,收集第二次离心后的中层液体,得到肠道酶液;步骤2:在蜂王浆中,加入pH值为7.0~7.2的磷酸盐缓冲液或Tris‑HCl缓冲溶液,在18000~25000g,4℃条件下离心20~30min,收集上清液,经截留分子量为8000~14000的透析袋在pH值为7.0~7.2的磷酸盐缓冲液或Tris‑HCl缓冲溶液中冰浴透析42~72h,收集透析袋中透析液,得到水溶性蜂王浆蛋白液;步骤3:以mg/mL计,将步骤1所得的肠道酶液与步骤2所得的水溶性蜂王浆蛋白液按照蛋白浓度比为30~35∶80~90混合,在pH值为8.3~8.7,温度为34~39℃的条件下酶解22~26h,得到水溶性蜂王浆蛋白酶解液;步骤4:将步骤3所述的水溶性蜂王浆蛋白酶解液冰浴停止酶解反应,然后在8000~15000g,4℃条件下离心10~20min,收集上清液,用10μm微孔滤膜过滤后,收集滤液得到第一滤液,将所述第一滤液经5kDa的超滤膜过滤,收集滤液得到第二滤液,将所述第二滤液经3kDa的超滤膜过滤,收集截留物得到3~5kDa的蜂王浆多肽。
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