[发明专利]快速检测人肠道病毒71型的荧光定量PCR试剂盒

摘要

本发明公开了一种快速检测人肠道病毒71型的荧光定量PCR试剂盒，涉及一种引起人类多种疾病病原体基因检测技术，适用于人肠道病毒71型定性定量检测。该试剂盒包括RNA提取液、荧光定量PCR反应液、EV71标准阳性模板PMD18-T-EV71和阴性质控标准品；所述的荧光定量PCR反应液含有人肠道病毒71型特异性引物对和荧光探针。本发明定量准确；检测速度快；特异性好，灵敏度高；可鉴定区别检测人肠道病毒71型；使用步骤简单，可重复性高。本试剂盒可对人肠道病毒71型进行快速定性定量检测，并可替代一直沿用的传统的培养法。

主权项

一种快速检测人肠道病毒71型荧光定量PCR试剂盒，其特征在于包括：RNA提取液、荧光定量PCR反应液、EV71标准阳性模板PMD18‑T‑EV71和阴性质控标准品；所述的荧光定量PCR反应液含有人肠道病毒71型特异性引物对和荧光探针；正向引物为5′‑GCCCAATYACAGCCTATYATAATAGC‑3′，反向引物为5′‑TACARTCTGCCYACCCTARTCTC‑3′，其中正向引物可向5’和3’端方向各延伸10个碱基，反向引物可向5’和3’端方向各延伸10个碱基；荧光探针序列为5′‑CTAGCGGCAGCCCAAA‑3′，该荧光探针序列可向5’和3’端方向各延伸10个碱基，荧光探针5′端标记报告荧光基团FAM，3′端标记不发光的淬灭基团标记Eclipse，可以大大减少背景噪音的干扰，标准阳性模板PMD18‑T‑EV71是含有人肠道病毒71型VP1基因的124个碱基对的核苷酸片段构成的PMD18‑T载体，该载体可在大肠杆菌DH5α中增殖。