[发明专利]灯台叶中鸭脚树叶碱对照品及其制备方法

摘要

本发明涉及灯台叶中鸭脚树叶碱对照品及其制备方法。经：1)总生物碱的提取：2)鸭脚树叶碱的分离得含鸭脚树叶碱的Fr-A、浅黄色固体物Fr-B、灰白色固体物Fr-C、微淡黄色的针状结晶Fr-D，由Fr-D部分得无色针状结晶再丙酮重结晶，得到无色针状结晶，即为鸭脚树叶碱纯品，即为鸭脚树叶碱对照品。符合含量测定用中药质量标准用化学对照品的技术要求。本发明的鸭脚树叶碱对照品稳定性较好，可以用于含量分析工作。本发明的制备方法技术路线简明，成本较低，重现性好，可用于重复性制备。

主权项

一种灯台叶中鸭脚树叶碱对照品的制备方法，其特征在于按以下步骤进行：1)总生物碱的提取：灯台叶药材切碎，用水煮提二次，第一次加水8倍量煮提2小时，第二次加水6倍量煮提1小时；合并煮提液，减压浓缩为浸膏；浸膏加水搅散后用25‑28％浓氨水调pH为9.5，用氯仿萃取3次，氯仿萃取液加无水硫酸钠干燥，回收氯仿浸膏，将氯仿浸膏用甲醇热溶，加入粉末活性碳回流30分钟脱色，趁热过滤，减压回收甲醇，得灯台叶总生物碱；2)鸭脚树叶碱的分离：(1)总生物碱部分100g以200～500mL丙酮溶解，加入100～300g的氧化铝拌样，挥干溶剂后用氧化铝柱色谱分离，用环己烷‑乙酸乙酯溶剂系统梯度洗脱，环己烷∶乙酸乙酯＝100∶5～100∶90，各馏分用薄层色谱检查，得含鸭脚树叶碱的部分Fr‑A；(2)Fr‑A甲醇溶解后用硅胶拌样，挥干溶剂后再用硅胶柱色谱分离，以氯仿‑甲醇溶剂系统梯度洗脱，氯仿∶甲醇＝100∶5～100∶30，各馏分用薄层色谱检查，得含鸭脚树叶碱为主的浅黄色固体物Fr‑B；(3)Fr‑B部分用十八烷基键合硅胶柱色谱分离，用水‑甲醇溶剂系统梯度洗脱，水∶甲醇＝1∶1～1∶9，各馏分用HPLC检查，合并纯度大于90％的馏分，得灰白色固体物Fr‑C；(4)Fr‑C部分加甲醇溶解，再加粉末活性碳于水浴上回流脱色30分钟，趁热过滤，减压回收甲醇，用葡聚糖凝胶LH‑20柱色谱纯化，甲醇缓慢洗脱，各馏分用HPLC检查，合并纯度大于95％的馏分，减压回收甲醇，放置过夜后析出微淡黄色的针状结晶Fr‑D；(5)Fr‑D部分用无水丙酮热溶，滤过之后滴加10～15ml环己烷，放置过夜后析出无色针状结晶；此无色针状结晶再用4～10ml无水丙酮重结晶，得到无色针状结晶，即为鸭脚树叶碱纯品，即为鸭脚树叶碱对照品。