[发明专利]灯台叶中鸭脚树叶碱对照品及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及药品技术领域，具体地说是灯台叶中鸭脚树叶碱对照品及其制备方法。

背景技术

灯台树Alstonia scholaris(L.)R.Bro.是夹竹桃科鸡骨常山属植物，为常绿高大乔木，分布于热带及亚热带。生长于低山疏林、路旁和沟溪边。我国有鸡骨常山属植物6种，其中云南有4种，以灯台树最为常见，主要产于滇南及滇西南。

在傣族医药中，灯台树的各个部位均可入药应用，以灯台叶最有特色，傣药名称为“买担别”、“买丁别”(傣语音译，下同)，主治“乃多皇迈唉列习特来”(肺热咳嗽痰多)等^[1]。在汉族民间应用中，灯台叶称为“理肺散”，性味苦，凉；有止咳，祛痰，消炎的功效，用于治疗慢性支气管炎，百日咳等。除此外，云南其它少数民族，如佤族、哈尼族、拉祜族等，也使用灯台叶治疗呼吸系统疾病^[2-4]。

现代药理学研究证明，灯台叶具有祛痰、镇咳、平喘、退热及对抗乙酰胆碱、组织胺等作用，临床用于治疗慢性支气管炎、咳嗽、咯痰等病症有显着疗效。化学成分研究表明，灯台叶主要含有生物碱和黄酮类成分，以生物碱类的研究较深入，灯台叶生物碱主要属吲哚单萜类，以鸭脚树叶碱(picrinine)的含量最高。

由于灯台叶疗效确切，又是具有傣族医药特色的民族药物，灯台叶被数种中草药民族药志书收载，亦为《云南省药品标准》(1974、1996年版)，《中国药典》(1977年版)收录^[5-6]。从20世纪70年代以来，以灯台叶药材为原料，已经开发了“灯台叶颗粒”、“灯台叶片”等制剂用于呼吸道疾病的治疗，形成了一定的产业规模。

但在产品质量标准方面，灯台叶药材执行的是《中国药典》1977年版，制剂也基本上是1997-1998年间颁布的卫生部标准，相关的质量控制项目及方法均比较简单，已经不适应中药现代化发展的要求，应进一步研究其质量标准，建立更加科学、客观、定量化的检验项目来保证药品质量。对于中药制剂，由于成分比较复杂，完全的成分控制是不现实的，也是不必要的，但以中药的主要有效成分，或者具有标示性意义的化学成分为目标物，建立直接的定性、定量检验项目，是符合目前中药产业技术发展水平，相对合理、可行的质量控制方法。

要建立化学成分的定性、定量检验项目，最基础的工作是用于质量控制的标准物质----化学对照品的选择、制备和含量标定。

发明内容

本发明的目的是提供一种灯台叶中鸭脚树叶碱对照品及其制备方法。

鸭脚树叶碱是从灯台叶中分离得到的生物碱成分，具有松弛气管平滑肌等药理作用，是灯台叶的有效成分之，且在药材中含量相对较高，可作为灯台叶药材及其制剂的标示性成分用于质量控制。

本发明的灯台叶中鸭脚树叶碱对照品的制备是以灯台树的干燥叶为原料，用水、氯仿等溶剂提取并辅以酸碱处理，得到总生物碱；总生物碱进一步用氧化铝、硅胶、十八烷基键合硅胶、葡聚糖凝胶LH-20等色谱分离方法，结合重结晶等手段，分离制备了鸭脚树叶碱对照品。具体技术方案如下：

1)总生物碱的提取：灯台叶药材切碎，用水煮提二次，第一次加水8倍量煮提2小时，第二次加水6倍量煮提1小时；合并煮提液，减压浓缩为浸膏；浸膏加水搅散后用25-28％浓氨水调pH为9.5，用氯仿萃取3次，氯仿萃取液加无水硫酸钠干燥，回收氯仿浸膏，将氯仿浸膏用甲醇热溶，加入甲醇热溶后的氯仿浸膏的质量百分比0.1％～0.3％的粉末活性碳回流30分钟脱色，趁热过滤，减压回收甲醇，得灯台叶总生物碱；

2)鸭脚树叶碱的分离

(1)总生物碱部分100g以200～500mL丙酮溶解，加入100～300g的氧化铝拌样，挥干溶剂后用氧化铝柱色谱分离，用环己烷-乙酸乙酯(环己烷∶乙酸乙酯＝100∶5～100∶90)溶剂系统梯度洗脱，各馏分用薄层色谱检查，得含鸭脚树叶碱的部分Fr-A；

(2)Fr-A甲醇溶解后用硅胶拌样，挥干溶剂后再用硅胶柱色谱分离，以氯仿-甲醇溶剂系统梯度(氯仿∶甲醇＝100∶5～100∶30)洗脱，各馏分用薄层色谱检查，得含鸭脚树叶碱为主的浅黄色固体物Fr-B；

(3)Fr-B部分用十八烷基键合硅胶柱色谱分离，用水-甲醇(水∶甲醇＝50∶50～10∶90)溶剂系统梯度洗脱，各馏分用HPLC检查，合并纯度大于90％(峰面积归一法)的馏分，得灰白色固体物Fr-C；