[发明专利]灯台叶中鸭脚树叶碱对照品及其制备方法

权利要求书

1.一种灯台叶中鸭脚树叶碱对照品的制备方法，其特征在于按以下步骤进行：

1)总生物碱的提取：灯台叶药材切碎，用水煮提二次，第一次加水8倍量煮提2小时，第二次加水6倍量煮提1小时；合并煮提液，减压浓缩为浸膏；浸膏加水搅散后用25-28％浓氨水调pH为9.5，用氯仿萃取3次，氯仿萃取液加无水硫酸钠干燥，回收氯仿浸膏，将氯仿浸膏用甲醇热溶，加入粉末活性碳回流30分钟脱色，趁热过滤，减压回收甲醇，得灯台叶总生物碱；

2)鸭脚树叶碱的分离：

(1)总生物碱部分100g以200～500mL丙酮溶解，加入100～300g的氧化铝拌样，挥干溶剂后用氧化铝柱色谱分离，用环己烷-乙酸乙酯溶剂系统梯度洗脱，环己烷∶乙酸乙酯＝100∶5～100∶90，各馏分用薄层色谱检查，得含鸭脚树叶碱的部分Fr-A；

(2)Fr-A甲醇溶解后用硅胶拌样，挥干溶剂后再用硅胶柱色谱分离，以氯仿-甲醇溶剂系统梯度洗脱，氯仿∶甲醇＝100∶5～100∶30，各馏分用薄层色谱检查，得含鸭脚树叶碱为主的浅黄色固体物Fr-B；

(3)Fr-B部分用十八烷基键合硅胶柱色谱分离，用水-甲醇溶剂系统梯度洗脱，水∶甲醇＝1∶1～1∶9，各馏分用HPLC检查，合并纯度大于90％的馏分，得灰白色固体物Fr-C；

(4)Fr-C部分加甲醇溶解，再加粉末活性碳于水浴上回流脱色30分钟，趁热过滤，减压回收甲醇，用葡聚糖凝胶LH-20柱色谱纯化，甲醇缓慢洗脱，各馏分用HPLC检查，合并纯度大于95％的馏分，减压回收甲醇，放置过夜后析出微淡黄色的针状结晶Fr-D；

(5)Fr-D部分用无水丙酮热溶，滤过之后滴加10～15ml环己烷，放置过夜后析出无色针状结晶；此无色针状结晶再用4～10ml无水丙酮重结晶，得到无色针状结晶，即为鸭脚树叶碱纯品，即为鸭脚树叶碱对照品。

2.一种权利要求1所述的灯台叶中鸭脚树叶碱对照品的制备方法制备的灯台叶中鸭脚树叶碱对照品。