[发明专利]一种微囊藻毒素的提取和纯化方法有效
| 申请号： | 201010524841.4 | 申请日： | 2010-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN101955517A | 公开（公告）日： | 2011-01-26 |
| 发明（设计）人： | 谢平;王文静;国晓春;梁高道;吴来燕;张伟;戴明;张大文 | 申请（专利权）人： | 中国科学院水生生物研究所 |
| 主分类号： | C07K14/405 | 分类号： | C07K14/405;C07K1/20;C07K1/16;C07K1/14 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 430072 *** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种微囊藻毒素的提取和纯化方法，是一种以收获于野外的水华蓝藻的干粉为原料，从中提取高纯度的微囊藻毒素MC-RR与MC-LR的方法，步骤如下：A、甲醇粗提微囊藻毒素MC-RR与MC-LR；B、粗提液过ODS柱精提微囊藻毒素MC-RR与MC-LR；C、半制备色谱仪分离微囊藻毒素MC-RR与MC-LR；D、微囊藻毒素MC-RR与MC-LR保存。本发明方法原料来源广，成本低，操作过程简单，并且所提取出的微囊藻毒素的纯度均在97%以上，符合科研工作对毒素纯度的要求。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 微囊藻 毒素 提取 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种微囊藻毒素的提取和纯化方法，步骤如下：①、称取蓝藻藻粉，按30‑40ml/g的比例加入60v/v%的甲醇溶解8‑20℃下200rpm摇床振荡1h，再超声促溶处理20min后，移入离心管，离心使固液分离；②、倾出上清液，步骤①中得到的沉淀再用60v/v%的甲醇重复提取一次，合并两次提取的上清液；③、调节步骤②得到的上清液的pH至4，静置60min后，移入离心管，离心后，倾出上清液，调节上清液的pH至8；④、将步骤③最后得到的溶液浓缩，每3g藻粉得到40ml粗提液；⑤、每10ml粗提液注入一个ODS柱，每个ODS柱依次用20v/v%甲醇30ml、 30v/v%甲醇20ml、40v/v%甲醇10ml冲洗；再用含有0.02v/v%三氟乙酸的70v/v%甲醇溶液10ml洗脱，弃去洗脱液；然后用含0.02v/v%三氟乙酸的70v/v%甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，直至洗脱液无色；⑥、将步骤⑤中收集的洗脱液混合后，旋转蒸发至溶剂完全挥发；⑦、按每3g藻粉原料加入1.5ml 50v/v%甲醇溶液溶解步骤⑥得到的固形物，离心后的上清液为精提液；⑧、精提液注入waters半制备色谱仪，收集MC‑RR和MC‑LR峰，收集完后，分别合并从半制备色谱仪上收集到的MC‑RR和MC‑LR洗脱液，移入圆底烧瓶，旋转蒸发至干固，均加入甲醇溶解；⑨、将步骤⑧得到的MC‑RR和MC‑LR的甲醇溶液分别挥干溶剂后，铝箔包裹，‑80℃保存。
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- 本发明公开了一种高效萃取藻红蛋白的双水相法，1)双水相相图的绘制。2)选择双相点，预实验。3)比较不同盐体系的提取纯度，选择合适的PEG/盐体系。4)双水相体系不同参数对纯度的影响：比较PEG不同分子质量、不同系线长、不同的体积比、不同pH值等。5)多次双水相实验，选择最优次数。该方法简化蛋白质提纯过程，大规模、易操作、成本低、得率高，高效环保。
- 一种抗氧化多肽-201410079022.1
- 汪少芸;吴金鸿;蔡茜茜;方卫东;赵立娜;洪晶;廖兰 - 福州大学
- 2014-03-06 - 2014-06-25 - C07K14/405
- 本发明提供了一种抗氧化多肽及其制备方法，该方法以小球藻蛋白为原料，通过对酸性蛋白酶的酶解，分离纯化得到特异性抗氧化多肽，其氨基酸全序列为：aetiglap。本发明消除了天然抗氧化剂所具有的缺陷并且消除了公众对人工合成抗氧化剂的忧虑，为开发基于食品源的抗氧化多肽以及探索其在食品、医学上的广泛应用奠定基础。
- 专利分类
