[发明专利]用ISSR分子标记法对新疆药用阿魏品种进行快速鉴别的方法无效

专利信息
申请号: 201010259524.4 申请日: 2010-08-23
公开(公告)号: CN102373269A 公开(公告)日: 2012-03-14
发明(设计)人: 凯撒·苏来曼;赵鑫;阿依别克·热合木都拉;朱国强 申请(专利权)人: 新疆维吾尔自治区中药民族药研究所
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 石河子恒智专利代理事务所 65102 代理人: 李伯勤
地址: 830002 新疆*** 国省代码: 新疆;65
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摘要: 发明公开了一种用ISSR分子标记法对新疆药用阿魏品种进行快速鉴别的方法,以新疆阿魏幼苗为材料取样冷冻,所使用的引物序列(5---3)为:(CT)8RC,所用的引物浓度为:0.6~0.85vmol/L,采用改良的CTAB微量法提取基因组总DNA,用0.6~1.0%的琼脂糖电泳检测DNA质量,DNA的纯度和浓度用紫外分光光度计法测定,检测所用的试剂:dNTPs浓度为:0.4~0.8mmol/L,Mg2+浓度为:浓度为1.0~1.5mmol/L,TaqDNA聚合酶浓度:1.0~1.5U。采用本发明的方法对新疆药用阿魏进行品种鉴定、种质资源和遗传多样性进行研究,具有模板需要量少、多态性丰富、成本低、操作简单、稳定性高等优点,而较之AFLP又具技术要求较低的特点。
搜索关键词: issr 分子 标记 新疆 药用 阿魏 品种 进行 快速 鉴别 方法
【主权项】:
一种用ISSR分子标记法对新疆药用阿魏品种进行快速鉴别的方法,其特征在于主要采用以下过程实现:以新疆阿魏幼苗为材料,具体方法是将解除休眠的新疆阿魏种子播于穴盘萌发幼苗,待幼苗长出两片真叶时取样,液氮冷冻后于‑70~ ‑100℃保存,待用;所使用的引物序列(5‑‑‑3)为:(CT)8RC;基因组DNA的提取及DNA质量检测:采用改良的CTAB微量法提取基因组总DNA,用0.6~1.0%的琼脂糖电泳检测DNA质量,DNA的纯度和浓度用紫外分光光度计法测定,并将DNA浓度稀释到10~30ng/vL,于‑18~ ‑25℃保存备用;检测所用的引物浓度为: 0.6~0.85vmol/L,dNTPs浓度为: 0.4~0.8mmol/L,Mg2+浓度为:浓度为1.0~1.5mmol/L,Taq DNA聚合酶浓度为: 1.0~1.5U。
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