[发明专利]一种广州管圆线虫环介导等温扩增检测方法有效
| 申请号： | 201010242235.3 | 申请日： | 2010-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN101899521A | 公开（公告）日： | 2010-12-01 |
| 发明（设计）人： | 陈睿;陆绍红;童群波;张仪;楼涤;卓敏敏 | 申请（专利权）人： | 浙江省医学科学院;中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 韩介梅 |
| 地址： | 310013 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物技术领域，特别是用于寄生虫病快速检测技术中的一种利用环介导等温扩增技术快速检测广州管圆线虫的方法。该方法包括两对用于检测广州管圆线虫的环介导等温扩增引物FIP、BIP、F3与B3，和一种利用上述两对引物检测广州管圆线虫的LAMP方法，其中包括反应模板的制备、LAMP反应体系、LAMP反应程序和检测结果判断。其操作简便、成本低廉，结果易于观察，非常适用于广州管圆线虫的现场快速检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 广州 线虫 环介导 等温 扩增 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种广州管圆线虫环介导等温扩增检测方法，其特征在于根据恒温核酸扩增方法的技术原理，针对广州管圆线虫的特异性片段设计4条引物，识别靶序列的6个区域，利用BstDNA酶的链置换特性，在等温条件下生成大量重复的茎环状结构；设计扩增广州管圆线虫18srRNA基因的4条特异性引物为：FIP：5’-CCTGGTGGTGCCATTCCGTCTCTTTCGGTTCCTGGGGTAG-3’BIP：5’-GCCCGGACACCGTAAGGATTGCACCACCAACCACCAAAT-3’F3：5’-TTGTCGAGGAGCTTCCCG-3’B3：5’-CACCAACTAAGAACGGCCAT-3’提取样品DNA后，环介导等温扩增(LAMP)反应体系扩增靶DNA，环介导等温扩增(LAMP)检测体系由一套设计的引物、10×LAMP反应液、DNA聚合酶、阳性对照、阴性对照和显色剂组成，并对LAMP反应条件进行优化。
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