[发明专利]一种荧光T载体及其构建方法和应用无效
| 申请号： | 201010204691.9 | 申请日： | 2010-06-18 |
| 公开（公告）号： | CN102080094A | 公开（公告）日： | 2011-06-01 |
| 发明（设计）人： | 范军;张宽亮;李静 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/66;C12N15/65;C12N1/21 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 230036 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种荧光T载体以及其的构建方法，还涉及该荧光T载体在基因克隆中的应用，其中荧光T载体为在出发载体pMD18-TSimple Vector中引入增强子序列和编码红色荧光蛋白UPMT的cobA基因序列。该荧光T载体灵敏度高，在唯一保守位点插入一个碱基就可导致红色荧光蛋白(UPMT)荧光的丧失，从而克服了常规T载体通过蓝白斑对小片段插入重组子筛选时假阳性偏高的现象。同时，该T载体克隆PCR产物通过有无荧光对重组子进行筛选，不需要添加额外的底物和诱导剂如：X-gal and IPTG，成本低，操作步骤少，灵敏度又高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 荧光 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种荧光T载体，其特征在于在出发载体pMD18‑T SimpleVector中引入增强子序列和编码红色荧光蛋白UPMT的cobA基因序列，所述cobA基因序列远5`端的SamⅠ酶切位点为酶的保守位点。
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