[发明专利]伤寒、副伤寒沙门菌多重荧光PCR检测方法及检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种伤寒、副伤寒沙门菌多重荧光PCR检测方法和检测试剂盒，所述检测方法和试剂盒包括：分别特异性扩增伤寒沙门菌和丙型、甲型、乙型副伤寒沙门菌ViaB基因序列、fliC-a基因序列、fliC-b基因序列和ssaR基因序列的加尾引物，其碱基序列如SEQ IDNO：1、2、4、5、7、8、10和11所示；用于检测伤寒沙门菌和丙型、甲型、乙型副伤寒沙门菌ViaB基因、fliC-a基因、fliC-b基因和ssaR基因的分子信标探针，其碱基序列如SEQ ID NO：3、6、9和12所示。本申请提供的检测方法和试剂盒在检测灵敏度指标方面已达到金标准培养法灵敏度水平，与传统的培养法相比具有快速灵敏、操作简便、结果客观准确等优点。

主权项

一种伤寒、副伤寒沙门菌多重荧光PCR检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括：特异性扩增伤寒沙门菌和丙型副伤寒沙门菌ViaB基因序列的加尾引物，其碱基序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；用于检测伤寒沙门菌和丙型副伤寒沙门菌ViaB基因的分子信标探针，其碱基序列如SEQ ID NO：3所示；特异性扩增甲型副伤寒沙门菌fliC‑a基因序列的加尾引物，其碱基序列如SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5所示；用于检测甲型副伤寒沙门菌fliC‑a基因的分子信标探针，其碱基序列如SEQ ID NO：6所示；特异性扩增乙型副伤寒沙门菌fliC‑b基因序列的加尾引物，其碱基序列如SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示；用于检测乙型副伤寒沙门菌fliC‑b基因的分子信标探针，其碱基序列如SEQ ID NO：9所示；特异性扩增沙门菌ssaR基因序列的加尾引物，其碱基序列如SEQID NO：10和SEQ ID NO：11所示；用于检测沙门菌ssaR基因的分子信标探针，其碱基序列如SEQ IDNO：12所示。