[发明专利]恶臭假单胞菌谷胱甘肽-非依赖型甲醛脱氢酶的原核表达载体及其构建方法和应用无效
| 申请号： | 201010172232.7 | 申请日： | 2010-05-14 |
| 公开（公告）号： | CN101864446A | 公开（公告）日： | 2010-10-20 |
| 发明（设计）人： | 陈丽梅;张婧;孟庆超;年洪娟;李昆志 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/53;C12N9/02 |
| 代理公司： | 昆明今威专利代理有限公司 53115 | 代理人： | 赛晓刚 |
| 地址： | 650093 云南省昆明*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高效表达恶臭假单胞菌谷胱甘肽-非依赖型甲醛脱氢酶蛋白的原核表达载体pET28a-PADH。该载体是含有恶臭假单胞菌谷胱甘肽-非依赖型甲醛脱氢酶基因(PADH)的原核表达载体。本发明从恶臭假单胞菌中克隆出PADH基因，用T7启动子控制它在大肠杆菌中的表达，表达的重组蛋白质40％以可溶性形式存在于上清中(占大肠杆菌可溶性总蛋白30％)，60％存在于包涵体中，通过割胶纯化从上包涵体中很容易获得高纯度的PADH重组蛋白质，可作为抗原用于PADH特异性抗体的制备。用亲和层析很容易从大肠杆菌可溶性总蛋白中纯化出有活性的重组PADH蛋白质，用于PADH酶制剂的生产及其生化特性分析。 | ||
| 搜索关键词： | 恶臭 假单胞菌 谷胱甘肽 依赖 甲醛 脱氢酶 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
PADH的原核表达载体pET28a-PADH，该载体含有T7启动子和终止子、细菌核糖体结合位点RBS和PADH基因及一个组氨酸标签。
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