[发明专利]一种针对一个或多个目标基因组区域进行边扩增边连接的方法

摘要

本发明涉及一种针对一个或多个目标基因组区域进行边扩增边连接的公用接头设计方法。本发明又涉及一种针对一个或多个目标基因组区域进行边扩增边连接的方法。本发明所述方法适用于针对任意长度的目标基因组区域的边扩增边连接工作，所得到的非特异连接的长链DNA可根据研究需要应用于多种DNA分析平台。本发明还涉及一种针对一个或多个目标基因组区域序列重测序工作、建立随机DNA文库的方法，所得随机DNA文库可用于通过包括Sanger测序技术、边合成边测序技术在内的测序方法对所述一个或多个目标基因组区域序列进行重测序。

主权项

一种对一个和多个目标基因组区域进行边扩增边连接的公用接头，其包括两条以5’→3’方向和以3’→5’方向碱基互补的寡核苷酸序列，所述寡核苷酸序列的结构特征为：1)在多核苷酸扩增和连接退火温度下不与目标基因组结合；2)自身不形成发夹等二级结构；3)胞嘧啶和鸟嘌呤的含量占四种碱基数量总和的20％-80％；且4)序列长度在7-100碱基，所述碱基互补的寡核苷酸序列为GTAAAACGACGGCCAGT和ACTGGCCGTCGTTTTAC。