[发明专利]二维蛋白质电泳提升测量精度的方法有效
申请号: | 201010114460.9 | 申请日: | 2010-02-12 |
公开(公告)号: | CN102156160A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 陈翰民 | 申请(专利权)人: | 陈翰民 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
代理公司: | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人: | 张瑾 |
地址: | 中国台湾台北市大安*** | 国省代码: | 中国台湾;71 |
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摘要: | 本发明提供一种二维蛋白质电泳的等电聚焦法提升实验精度的方法,尤指一种借由测量蛋白质待测物的导电度,以计算其中盐类及蛋白质聚焦所需要的电能,其特点在于以一组公式,根据盐类的不同导电度、蛋白质重量、pH梯度胶体长度与pH值范围的环境下,分别计算出蛋白质聚焦时与盐类泳动所需的电能,可以于等电聚焦法中,提供个别蛋白质待测物实验适当的电能,以呈现最佳蛋白质聚焦结果,避免因电能不足或过大时,影响胶体上的蛋白质聚焦。 | ||
搜索关键词: | 二维 蛋白质 电泳 提升 测量 精度 方法 | ||
【主权项】:
一种二维蛋白质电泳提升测量精度的方法,其特征在于,主要步骤包括有:(a)测量蛋白质待测物的重量Mexp;(b)测量蛋白质待测物中盐类导电度Sexp;(c)代入如下公式以计算出提供该蛋白质待测物最佳总蛋白质聚焦电能,其公式包含: Vh protein _ exp = Vh protein _ ref × M exp M ref × striplength exp striplength ref × pHrange ref pHrange exp ( c 1 ) Vh salt _ exp = Vh salt _ ref × S exp - S blank S ref - S blank × striplength exp striplength ref × pHrange ref pHrange exp - - - ( c 2 ) Vhtotal_exp=Vhsalt_exp+Vhprotein_exp (c3)其中Vhsalt_ref、Vhprotein_ref分别为经由实验结果参考所建立的标准盐类泳动电能与标准蛋白质聚焦电能;Vhsalt_exp、Vhpotein_exp分别为借由公式计算得到的未知盐类泳动电能与蛋白质聚焦电能;Mref、Mexp分别为标准蛋白质重量与蛋白质待测物重量;Sblank、Sref、Sexp分别为不含蛋白质的胶体溶液导电度、标准盐类导电度与未知测量盐类导电度;strip lengthref、striplengthexp分别为标准pH梯度胶体长度与实际pH梯度胶体长度;pH rangeref、pH rangeexp分别为标准pH范围与实际pH范围。(d)将蛋白质待测物中盐类的导电度、蛋白质重量、pH梯度胶体长度与pH值范围的参数代入步骤(c)所述公式,计算出最佳总蛋白质聚焦电能,可呈现最佳蛋白质聚焦结果。
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