[发明专利]制备重组人白细胞介素11的方法无效
申请号: | 201010107440.9 | 申请日: | 2010-01-29 |
公开(公告)号: | CN102140487A | 公开(公告)日: | 2011-08-03 |
发明(设计)人: | 韩为跃;叶学君;杨立明;阳勇;张仁怀;何凯;汪猜;张风豪 | 申请(专利权)人: | 东莞太力生物工程有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/22;C07K1/18 |
代理公司: | 北京天昊联合知识产权代理有限公司 11112 | 代理人: | 丁业平;戚秋鹏 |
地址: | 523581 广东省东莞市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供一种制备重组人白细胞介素11的方法,该方法包括:1)提供融合蛋白,所述融合蛋白从N端到C端依次为:硫氧还蛋白-(His)6-蛋白水解酶识别位点-重组人白细胞介素11或(His)6-硫氧还蛋白-蛋白水解酶识别位点-重组人白细胞介素11;2)用所述蛋白水解酶对所述融合蛋白进行酶切,从而获得酶切产物,所述酶切产物包含硫氧还蛋白和重组人白细胞介素11;和3)使用镍离子螯合亲和柱层析法对所述酶切产物进行纯化,其中所述硫氧还蛋白和所述重组人白细胞介素11均被吸附到所述柱上,然后对所述柱进行梯度洗脱,从而获得rhIL-11。利用本发明的方法可快速、简便、高效地纯化rhIL-11,从而大大提高回收率。 | ||
搜索关键词: | 制备 重组 白细胞 11 方法 | ||
【主权项】:
一种制备重组人白细胞介素11的方法,该方法包括:1)提供融合蛋白,所述融合蛋白从N端到C端依次为:硫氧还蛋白‑(His)6‑蛋白水解酶识别位点‑重组人白细胞介素11或(His)6‑硫氧还蛋白‑蛋白水解酶识别位点‑重组人白细胞介素11;2)用所述蛋白水解酶对所述融合蛋白进行酶切,从而获得酶切产物,所述酶切产物包含硫氧还蛋白和重组人白细胞介素11;和3)使用镍离子螯合亲和柱层析法对所述酶切产物进行纯化,其中所述硫氧还蛋白和所述重组人白细胞介素11均被吸附到所述柱上,然后对所述柱进行梯度洗脱,从而获得重组人白细胞介素11。
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