[发明专利]栀子苷元的制备方法

摘要

本发明公开了一种栀子苷元的制备方法。本发明以海藻酸钠为载体、戊二醛为交联剂对糖苷水解酶进行固定化，固定化糖苷水解酶酶在醋酸-酸酸钠缓冲液和乙酸乙酯组成的双相系统中催化水解栀子苷，使栀子苷转化成为栀子苷元，然后将反应液中的乙酸乙酯分离出来，经过浓缩和结晶后得到白色的栀子苷元晶体。本发明将糖苷水解酶固定化以后进行酶促反应，可以减少酶与栀子苷元之间的副反应，并使该酶能够反复回收利用，降低了生产成本；本发明使用的双相系统可以在反应的同时将栀子苷元从水相中萃取到乙酸乙酯相，减少了栀子苷元自身的水解反应和酶与栀子苷元之间的副反应，提高了栀子苷元的产率，加快了反应时间，也使得产物的分离纯化更易进行。

主权项

一种栀子苷元的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)糖苷水解酶的固定化：以终浓度为2～3％的海藻酸钠作载体对糖苷水解酶进行包埋，并且用0.5～1％的戊二醛交联，制成固定化糖苷水解酶；(2)双相系统酶促反应：将固定化糖苷水解酶和栀子苷加入到pH值为4.0～5.5的醋酸‑醋酸钠缓冲液和乙酸乙酯组成的双相系统中，在45～60℃温度条件下反应1.5～3.5h；(3)分离：将固定化酶与反应液分离并回收，然后将反应液中的缓冲液和乙酸乙酯分离；(4)萃取：将分离后的缓冲液层用乙酸乙酯(体积比1∶1)萃取两次，并与反应液体中的乙酸乙酯合并；(5)干燥：将合并后的乙酸乙酯萃取液用适量硫酸钠干燥20～40min；(6)浓缩：减压回收乙酸乙酯，浓缩至原来体积的1～5％；(7)结晶：将浓缩后的液体置于‑5～4℃条件下结晶，回收晶体；(8)真空干燥：将晶体于30～50℃真空干燥0.5～1h，所得白色晶体即为栀子苷元。