[发明专利]栀子苷元的制备方法有效
| 申请号： | 201010105535.7 | 申请日： | 2010-02-04 |
| 公开（公告）号： | CN102146423A | 公开（公告）日： | 2011-08-10 |
| 发明（设计）人： | 张彤;杨轶舜;于筛成;丁越;玄振玉 | 申请（专利权）人： | 上海中医药大学 |
| 主分类号： | C12P17/06 | 分类号： | C12P17/06;C12N11/10;C12N11/04 |
| 代理公司： | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人： | 潘诗孟 |
| 地址： | 201203 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 栀子 制备 方法 | ||
1.一种栀子苷元的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)糖苷水解酶的固定化：以终浓度为2～3％的海藻酸钠作载体对糖苷水解酶进行包埋，并且用0.5～1％的戊二醛交联，制成固定化糖苷水解酶；
(2)双相系统酶促反应：将固定化糖苷水解酶和栀子苷加入到pH值为4.0～5.5的醋酸-醋酸钠缓冲液和乙酸乙酯组成的双相系统中，在45～60℃温度条件下反应1.5～3.5h；
(3)分离：将固定化酶与反应液分离并回收，然后将反应液中的缓冲液和乙酸乙酯分离；
(4)萃取：将分离后的缓冲液层用乙酸乙酯(体积比1∶1)萃取两次，并与反应液体中的乙酸乙酯合并；
(5)干燥：将合并后的乙酸乙酯萃取液用适量硫酸钠干燥20～40min；
(6)浓缩：减压回收乙酸乙酯，浓缩至原来体积的1～5％；
(7)结晶：将浓缩后的液体置于-5～4℃条件下结晶，回收晶体；
(8)真空干燥：将晶体于30～50℃真空干燥0.5～1h，所得白色晶体即为栀子苷元。
2.根据权利要求1所述的栀子苷元的制备方法，其特征在于，步骤(1)所使用的糖苷水解酶为β-葡萄糖苷酶或β-葡聚糖酶，其酶活力为200U/g～900U/g。
3.根据权利要求1或2所述的栀子苷元的制备方法，其特征在于，步骤(2)所使用的双相系统中，水相为醋酸-醋酸钠缓冲液，有机相为乙酸乙酯。
4.根据权利要求3所述的栀子苷元的制备方法，其特征在于，步骤(2)所使用醋酸钠缓冲液的pH值为4.0～5.0，酶促反应温度为50～60℃，反应时间为2.0～3.0h。
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