[发明专利]多核苷酸变体的组合自动化平行合成有效

专利信息
申请号: 200980159766.1 申请日: 2009-09-18
公开(公告)号: CN102803489A 公开(公告)日: 2012-11-28
发明(设计)人: 杰弗里·科尔贝克;本杰明·米杰茨;洛林·琼·吉尔;理查德·J·福克斯;韦丝娜·米切尔;凡植·罗伯特·朴;林恩·吉尔森 申请(专利权)人: 科德克希思公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12N15/63;C12Q1/68
代理公司: 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 代理人: 申基成;郑霞
地址: 美国加利*** 国省代码: 美国;US
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摘要: 本公开内容涉及用于有效合成、克隆、转化和筛选多核苷酸变体的大型多样文库的方法,所述多核苷酸变体相对于参考多核苷酸包含明确的核苷酸差异。
搜索关键词: 多核苷酸 变体 组合 自动化 平行 合成
【主权项】:
一种合成多个多核苷酸变体的方法,所述多核苷酸变体的每一个相对于参考多核苷酸序列具有至少一个确定的核苷酸差异,所述方法包括:(a)用多对正向引物和反向引物的每一对分别扩增参考多核苷酸模板,其中所述多对正向引物和反向引物包括多个确定的核苷酸差异,并且其中每对产生包括能够结合至少一个其他扩增子的相邻重叠序列的序列的扩增子;(b)分别组装多组扩增子,其中每组包括具有能够结合形成所述参考多核苷酸序列的全长的相邻重叠序列的扩增子;(c)复制多组组装的扩增子,从而合成多个多核苷酸变体;和(d)组合所述多个多核苷酸变体。
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