[发明专利]委陵菜黄酮的提取分离纯化生产工艺

摘要

本发明公开了一种中药委陵菜抗糖尿病作用化学成分-委陵菜黄酮的提取分离纯化工艺，属于中药有效成分提取分离工艺技术。所述化合物的结构如下所示：该化合物的提取分离和纯化工艺，其过程包括：将委陵菜粉碎，加60％乙醇以料液比8-6-6加热回流提取三次，过滤，合并滤液，减压蒸发浓缩至浸膏状物；然后以10倍量质量浓度30％乙醇溶解，3000r/min离心，上清液以20-60目的AB-8大孔吸附树脂柱分离，上样体积10BV(10倍柱体积)，吸附流速和洗脱流速为2BV/h，然后以3BV30％乙醇，5BV60％乙醇依次洗脱，收集60％乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味，得一混悬液A；然后以等体积30％乙醇溶解，离心，上清液以80-100目聚酰胺色谱柱分离，上样体积10BV，吸附和洗脱流速为2BV/h，以3BV30％乙醇，5BV60％乙醇依次洗脱，收集60％乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味，得一混悬液B；将混悬液B离心，离心后的沉淀以制备高速逆流色谱仪纯化：溶剂系统(体积比)：二氯甲烷∶甲醇∶水＝5∶4∶2，以下相为固定相，上相为流动相，流速2ml/min，反转分离，转速800rpm，检测波长254nm。收集流分：在开始出峰时间后13min开始，收集20min时间段的洗脱流分，减压浓缩除去有机溶剂，离心得到黄色沉淀，以少量30％乙醇溶液润洗2次，即得委陵菜黄酮精品。

主权项

1.一种委陵菜有效成分黄酮化合物提取分离纯化工艺，所述的委陵菜抗糖尿病化学成分，其结构式如下所示：上述的委陵菜黄酮的提取分离纯化工艺，其特征在于包括以下过程：(1)将委陵菜粉碎，以委陵菜的质量8倍的质量浓度60％乙醇浸泡过夜，加热回流提取1.5小时，过滤的滤渣，再以委陵菜的质量6倍的质量浓度60％乙醇加热回流提取1.5小时，过滤的滤渣，再以委陵菜的质量6倍的质量浓度60％乙醇加热回流提取1.5小时，合并三次提取的滤液，减压蒸发浓缩至浸膏状物；(2)将步骤(1)得到的膏状物用10倍量质量浓度30％乙醇溶解，3000r/min离心10min，以20-60目的AB-8大孔吸附树脂柱分离，上样体积10BV(10倍柱体积)，吸附流速为2 BV/h，然后以3 BV30％乙醇，5 BV60％乙醇，4 BV95％乙醇依次洗脱，洗脱流速2 BV/h，收集60％乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味，得一混悬液A；(3)将步骤(2)得到的混悬液A以等体积30％乙醇溶解，3000r/min离心10min，以80-100目聚酰胺色谱柱分离，上样体积10BV，吸附流速为2BV/h，然后以3BV30％乙醇，5BV60％乙醇，4BV95％乙醇依次洗脱，以洗脱流速2BV/h，收集60％乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味，得一混悬液B；(4)将步骤(3)得到的混悬液B离心，3000r/min离心10min，离心后的沉淀以制备高速逆流色谱仪纯化：溶剂系统(体积比)：二氯甲烷∶甲醇∶水＝5∶4∶2，以下相为固定相，上相为流动相，流速2ml/min，反转分离，转速800rpm，温度25℃，检测波长254nm。收集流分：在开始出峰时间后13min开始收集，收集20min时间段的洗脱流分。收集流分经减压浓缩除去有机溶剂得一含水混悬液，离心得到一黄色沉淀，以少量30％乙醇溶液润洗2次，即得委陵菜黄酮精品。